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我要睡觉

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达 已有2人参与

在收集蛋白的过程中发现蛋白变红了，而且还有一股臭臭的味道，请问是为什么，这种情况是正常的么？
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1楼 2014-06-07 12:36:00
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
收集过程中变红，还是洗脱的时候就是红的？

如果是逐步变红，可能是蛋白暴露在空气里后被氧化（cofactor, 金属离子），洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助，

能提供更多信息的话，会有助于进一步判断
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-06-08 18:47:22
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我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-06-08 18:47:22
收集过程中变红，还是洗脱的时候就是红的？

如果是逐步变红，可能是蛋白暴露在空气里后被氧化（cofactor, 金属离子），洗脱液里加入5-10 mM 的巯基乙醇应该有所帮助，

能提供更多信息的话，会有助于进一步判断

不好意思 可能是我没有说清楚 这里的红色不是指纯化后的蛋白是指在收菌的过程中发现菌体呈红色 想知道是什么原因引起的菌体变红，发臭
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3楼2014-06-09 23:33:11
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爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你用的什么宿主菌？我们曾经一次用毕赤酵母，用了假冒的氨水，结果诱导前期没事，到了60小时左右菌体裂解，发酵液变成红色，前期表达的蛋白也降解了。
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4楼2014-06-10 20:51:26
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我要睡觉

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爨乡主人 at 2014-06-10 20:51:26
你用的什么宿主菌？我们曾经一次用毕赤酵母，用了假冒的氨水，结果诱导前期没事，到了60小时左右菌体裂解，发酵液变成红色，前期表达的蛋白也降解了。

我是做原核表达，用的是Rosetta
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5楼2014-06-10 23:49:59
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