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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 蛋白质结构中大量保守的二硫键会妨碍它的重组表达吗
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风雪云

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质结构中大量保守的二硫键会妨碍它的重组表达吗 已有3人参与

蛋白质结构中大量保守的二硫键会妨碍它的重组表达吗
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1楼 2014-06-06 21:33:04
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风雪云

木虫 (小有名气)
在E.COli中表达
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2楼2014-06-06 21:34:01
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
常规大肠杆菌表达不具有形成二硫键的功能，你的产物基本已包涵体存在。
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3楼2014-06-07 00:11:54
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by viki_MDK at 2014-06-07 00:11:54
常规大肠杆菌表达不具有形成二硫键的功能，你的产物基本已包涵体存在。

不是能形成二硫键吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-06-07 12:43:51
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viki_MDK

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-06-07 12:43:51
不是能形成二硫键吗？
...

常规方法不能，当然可以尝试分泌表达，或者利用能形成二硫键的菌株。
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5楼2014-06-07 19:10:13
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爨乡主人

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不影响表达，但原核表达一般形成包涵体，想要二硫键再折叠形成的过程很复杂。采用原核的表达的话可以选择分泌到周质空间，或者选用能促进二硫键形成的宿主，都能促进二硫键形成。采用真核表达系统的话有翻译后修饰，分泌到保外的一般都是正确折叠的。
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6楼2014-06-10 20:59:53
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忘记将来

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还是选择真核系统吧
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7楼2014-06-11 11:08:06
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 忘记将来 at 2014-06-11 11:08:06
还是选择真核系统吧

酵母吗

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-06-11 12:13:33
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忘记将来

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-06-11 12:13:33
酵母吗
...

这个是常用的真核表达体系，也可以参考一下做你这个蛋白的文献
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9楼2014-06-11 14:34:00
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