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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 色谱柱理论塔板数和分离度不稳定
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zimouqiu

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱理论塔板数和分离度不稳定 已有7人参与

水相为高氯酸钠和乙酸铵，磷酸调PH为2.2，有机相为乙腈，连续进样2天后，色谱柱理论板数由10000下降至2000，分离度由2.9下降至不合格，请各位虫友分析可能是什么原因，应怎么解决呢？
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1楼 2014-06-06 15:09:02
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

柱子用过一段时间需要做SIP或CIP，用NaOH和异丙醇洗柱，防止微生物污染或是柱子堵塞。
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11楼2014-06-10 15:33:18
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zimouqiu: 金币+10, ★有帮助 2014-06-06 16:58:52
1、缓冲盐很少使用高氯酸盐，它具有强氧化性，可能会影响色谱柱
2、流动相pH过低，一般色谱柱在5-8之间。
3、连续进样而未清洗色谱柱也会造成杂质富集影响色谱柱甚至损坏
    办法就是尽量别使用高氯酸盐，其次清洗并活化色谱柱。
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2楼2014-06-06 15:45:16
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zimouqiu: 金币+5, ★有帮助 2014-06-06 16:59:09
高氯酸钠也是离子对试剂的一种 建议马上冲柱子 然后用甲醇小流苏活化过夜看会不会好点
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3楼2014-06-06 16:21:48
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zimouqiu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-06-06 15:45:16
1、缓冲盐很少使用高氯酸盐，它具有强氧化性，可能会影响色谱柱
2、流动相pH过低，一般色谱柱在5-8之间。
3、连续进样而未清洗色谱柱也会造成杂质富集影响色谱柱甚至损坏
    办法就是尽量别使用高氯酸盐，其次清 ...

1、前期工作已完成，色谱条件不会再进行改变；
2、进样成分很简单，只是进样量大；
3、出现该问题后，填充色谱柱可持续2天，又会出现相同问题。
谢谢你的建议！
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4楼2014-06-06 16:58:29
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