24小时热门版块排行榜    

查看: 3219  |  回复: 10

zimouqiu

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱理论塔板数和分离度不稳定 已有7人参与

水相为高氯酸钠和乙酸铵,磷酸调PH为2.2,有机相为乙腈,连续进样2天后,色谱柱理论板数由10000下降至2000,分离度由2.9下降至不合格,请各位虫友分析可能是什么原因,应怎么解决呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zimouqiu: 金币+10, 有帮助 2014-06-06 16:58:52
1、缓冲盐很少使用高氯酸盐,它具有强氧化性,可能会影响色谱柱
2、流动相pH过低,一般色谱柱在5-8之间。
3、连续进样而未清洗色谱柱也会造成杂质富集影响色谱柱甚至损坏
    办法就是尽量别使用高氯酸盐,其次清洗并活化色谱柱。
2楼2014-06-06 15:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zimouqiu: 金币+5, 有帮助 2014-06-06 16:59:09
高氯酸钠也是离子对试剂的一种 建议马上冲柱子 然后用甲醇小流苏活化过夜看会不会好点
3楼2014-06-06 16:21:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zimouqiu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-06-06 15:45:16
1、缓冲盐很少使用高氯酸盐,它具有强氧化性,可能会影响色谱柱
2、流动相pH过低,一般色谱柱在5-8之间。
3、连续进样而未清洗色谱柱也会造成杂质富集影响色谱柱甚至损坏
    办法就是尽量别使用高氯酸盐,其次清 ...

1、前期工作已完成,色谱条件不会再进行改变;
2、进样成分很简单,只是进样量大;
3、出现该问题后,填充色谱柱可持续2天,又会出现相同问题。
谢谢你的建议!
4楼2014-06-06 16:58:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zimouqiu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2014-06-06 16:21:48
高氯酸钠也是离子对试剂的一种 建议马上冲柱子 然后用甲醇小流苏活化过夜看会不会好点

低流速10%甲醇冲会不会有效果
5楼2014-06-06 16:59:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

这只是冲出来盐,活化还是用纯溶剂.

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-06-06 19:28:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秀古书生

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 谢谢交流 2014-06-07 11:05:55
明显柱子问题;高盐、低PH流动相,走完样品注意保养好柱子。
7楼2014-06-07 09:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喳喳的小巧

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们也出现过这样的情况,管路里面长毛了没看见,后来倒冲也没用,换了根柱子,你也可以倒冲下试试
小仙女美洋洋
8楼2014-06-09 15:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖

这个不一定是你流动相的问题,还需要排除一下你的样品问题。你的样品基质是什么?样品溶剂?样品本身也有可能对色谱柱寿命有影响,或者容易在色谱柱上残留,另外一个的话,就是排除一下系统的问题,做一下彻底的清洗。再一个也有可能是你的柱子之前用了很长时间,到了该换的时候了。
目前你可以试试反冲一下色谱柱,看看情况吧
人生若只如初见...
9楼2014-06-10 10:49:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

christally

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用乙腈:水=10:90冲洗色谱柱几小时,再用色谱级的异丙醇低流速冲洗几小时,后再用乙腈:水=10:90把异丙醇置换出来,最后再用乙腈饱和色谱柱,如果时间充足冲洗时间都可以再放宽
10楼2014-06-10 14:31:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zimouqiu 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+3 1234567wang 2026-08-24 9/450 2026-08-25 16:51 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +20 羊腰板 2026-08-21 23/1150 2026-08-25 16:34 by zsna
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 +6 ziyangfang 2026-08-25 8/400 2026-08-25 16:28 by 宝贝的猪
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 18/900 2026-08-25 14:50 by Weed114114
[基金申请] 什么时候开奖? +12 CrisMessi 2026-08-18 13/650 2026-08-25 14:40 by ZJTJZ
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见