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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞成团生长且生长缓慢
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cmlmeng

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞成团生长且生长缓慢 已有3人参与

我从别人那里拿来的Tn 细胞和Sf9细胞第二次传代以后就一直抱团生长，聚集在一起，都看不出细胞的形态了。而且生长特别缓慢，还有一些成团的漂浮的死细胞，这到底是什么情况，看也不像污染了，会不会是吹打的时候太用力，细胞损伤了？
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1楼 2014-06-06 11:21:03
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胰酶消化一下，经常换换培养基，提供新鲜的培养基。
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2楼2014-06-06 13:12:16
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暮云深

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一个问题！绝对是没有吹打开！没有混匀导致抱团。建议楼主离心后多吹打几下。多少下，100下差不多。不是你吹打不用力，而是没用力。力度楼主自己掌握一下
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3楼2014-06-06 15:11:29
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cmlmeng

新虫 (初入文坛)
我先前吹打的时候都是气泡，吹打太用力了，不是会有细胞碎片吗？
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4楼2014-06-06 16:17:12
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 暮云深 at 2014-06-06 15:11:29
一个问题！绝对是没有吹打开！没有混匀导致抱团。建议楼主离心后多吹打几下。多少下，100下差不多。不是你吹打不用力，而是没用力。力度楼主自己掌握一下

我请教了一个专门给生物试剂公司养细胞的人，他一听到我吹打100下吓一跳，说这样反复吹打培养基的pH早就改变了，不适合细胞生长，建议我换那种10ml移液管用洗耳球吹打10下左右，也就是用最少的次数将细胞吹散，但是我平常也吹100下长的好像也还好……
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5楼2014-06-06 17:04:48
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暮云深

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-06-06 17:04:48
我请教了一个专门给生物试剂公司养细胞的人，他一听到我吹打100下吓一跳，说这样反复吹打培养基的pH早就改变了，不适合细胞生长，建议我换那种10ml移液管用洗耳球吹打10下左右，也就是用最少的次数将细胞吹散，但是 ...

我一直都是100下的。

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6楼2014-06-06 22:43:56
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cmlmeng

新虫 (初入文坛)
细胞吹散了，但感觉还是长得不好，长得很慢，一般sf9，Tn细胞多久能长满？而且有的形态好像也跟之前的不太一样，特别奇怪。
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7楼2014-06-08 16:24:11
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树在田野

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

细胞h5和sf9倍增时间18h左右，sf9出现聚团算是正常的，h5聚团多不太正常。你的细胞是不是传代太多次了，而且经常以较高密度传代？

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好好学习
8楼2014-06-09 17:13:20
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liupeng0215

新虫 (初入文坛)
100次，要吹多久啊，4分钟能吹完吗？
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9楼2014-06-12 17:02:08
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yipan

铜虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 答非所问，恶意广告，多次违规 2014-07-08 12:34:45
本帖内容被屏蔽
10楼2014-07-07 16:10:02
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