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534760595

金虫 (小有名气)

[求助] 帮我看看96孔板的细胞什么情况

同一瓶细胞,种在瓶里的长得很好,种在96孔板的成团,且分布不均匀,请高手帮我分析一下原因。
下面是相关图片,KB细胞
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+1, 3u 2013-07-17 16:11:01
534760595: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-07-18 09:50:20
没图哦,96孔板内细胞密度过大的话,会导致结团和生长缓慢,分布不均匀可能是你接种96孔板子的时候没有吹打均匀的关系吧。
没具体接触你的操作过程,不好做更多判断了。
2楼2013-07-17 14:58:54
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534760595

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-07-17 14:58:54
没图哦,96孔板内细胞密度过大的话,会导致结团和生长缓慢,分布不均匀可能是你接种96孔板子的时候没有吹打均匀的关系吧。
没具体接触你的操作过程,不好做更多判断了。

非常感谢你的帮助,这是细胞图片
帮我看看96孔板的细胞什么情况
板10.jpg


帮我看看96孔板的细胞什么情况-1
板7.jpg


帮我看看96孔板的细胞什么情况-2
瓶4.jpg

3楼2013-07-18 09:28:59
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

下次接板子时候,多吹打一下。感觉吹打的问题可能性比较大,形态上来说没多少区别啊。说明细胞还是正常的,可能由于密度大了,才不长。
4楼2013-07-18 09:33:27
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534760595

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-07-17 14:58:54
没图哦,96孔板内细胞密度过大的话,会导致结团和生长缓慢,分布不均匀可能是你接种96孔板子的时候没有吹打均匀的关系吧。
没具体接触你的操作过程,不好做更多判断了。

同一瓶细胞,消化下来后一部分种在瓶子里面,一部分种在96孔板里面,隔夜后拍的图片
帮我看看96孔板的细胞什么情况-3
瓶2.jpg


帮我看看96孔板的细胞什么情况-4
瓶4.jpg

5楼2013-07-18 09:36:43
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534760595

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 534760595 at 2013-07-18 09:36:43
同一瓶细胞,消化下来后一部分种在瓶子里面,一部分种在96孔板里面,隔夜后拍的图片

瓶2.jpg

瓶4.jpg
...

20倍镜
帮我看看96孔板的细胞什么情况-5
板5.jpg

6楼2013-07-18 09:38:40
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果是同一瓶一起消化下来的,是不是你的密度导致的结团呢?你接板子的密度和瓶子的初始密度是一样的吗?
如果是一样的,也排除了消化手法和吹打的原因,那就不清楚了。一般结团是因为吹打和消化的原因。长不好和培养基,温湿度,细胞密度有关。你可以对照查一下原因。
7楼2013-07-18 09:43:21
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534760595

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-07-18 09:33:27
下次接板子时候,多吹打一下。感觉吹打的问题可能性比较大,形态上来说没多少区别啊。说明细胞还是正常的,可能由于密度大了,才不长。

从培养瓶的细胞看,细胞分散得很完全。今天去看了一下,瓶里的细胞已经长满了,板里的细胞还是一团一团的,会不会是这96孔板有问题,细胞贴不去?
8楼2013-07-18 09:49:52
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534760595

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wolfman840 at 2013-07-18 09:43:21
如果是同一瓶一起消化下来的,是不是你的密度导致的结团呢?你接板子的密度和瓶子的初始密度是一样的吗?
如果是一样的,也排除了消化手法和吹打的原因,那就不清楚了。一般结团是因为吹打和消化的原因。长不好和培 ...

非常感谢
9楼2013-07-18 10:05:21
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wolfman840

木虫 (正式写手)

贴补上的原因不一定是细胞板的问题,可能和血清,消化液残留,pH值有关。我遇到过Vero细胞在pH6.8以下贴壁不完全的情况。
10楼2013-07-18 10:13:03
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