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爽爽幸福

新虫 (初入文坛)

[求助] 请各位做过单抗纯化方法的童鞋,帮我看看哈~

1、请问制备的单抗亚型是IGa 类的,请问这种类型的单抗能否用辛酸-硫酸铵法来进行纯化?我看论文里能用辛酸硫酸铵法纯化的只有IGg类的。做出来的单抗的亚型是跟什么有关呢,为什么有的是IGa,有的就是IGg? IGa类的单抗做板好用吗?
2、 为什么做直接ELISA,直接包被单抗,会出现白板的情况,我确定酶标是好的,这就证明该抗体与96孔板的亲和力很差,是吗,还是有其他的原因?
3、做单抗,细胞融合后,一次克隆成功,大概获得20柱左右的细胞株,但是二次克隆已经克隆了十几次,也没克出来,这是怎么回事呢?这跟我细胞融合的时候,骨髓瘤状态不是很好有关吗?
  谢谢好心人,来帮俺回帖了,俺是一只新虫,木有很高的赏金,只能求助了!
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