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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 用DMSO配制的药物可以直接加到细胞培养基里吗？
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)

[求助] 用DMSO配制的药物可以直接加到细胞培养基里吗？已有2人参与

小弟研究的是药物对细胞代谢的影响，我发现我加药后的孔里出现大团黑色的东西，我怀疑是染了菌。但是我听师兄们说用DMSO溶的药物里是不会有菌的，而且我们冻存细胞时也是用的没灭菌的DMSO。求教各位前辈，DMSO配制的药物里会有菌吗？若果有菌如何除去，毕竟我的药物只加几uL.
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1楼2014-06-05 15:49:58
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
拉风蜗牛王: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2014-06-06 17:17:15
操作规范是不会有菌的啊，秤好药拿到超净台里去溶解，尽量减少在外面暴露的机会。
我不知DMSO能不能灭菌……我们实验室都是拿了新的DMSO在超净台里用，拿出来前就密封上，没有灭菌过。但配药解冻都没有菌。

你解冻细胞没加药前细胞有过污染吗?如何判定是DMSO溶解药物时带的菌呢？
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Permanent head Damage
2楼2014-06-05 17:06:39
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-06-05 17:06:39
操作规范是不会有菌的啊，秤好药拿到超净台里去溶解，尽量减少在外面暴露的机会。
我不知DMSO能不能灭菌……我们实验室都是拿了新的DMSO在超净台里用，拿出来前就密封上，没有灭菌过。但配药解冻都没有菌。

你解 ...

对照组长得好好的，唯独加药组长出一团团黑色的东西，而且做了MTT发现加药组MTT是对照的两倍！
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3楼2014-06-05 21:04:02
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sunrq516516

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 拉风蜗牛王 at 2014-06-05 23:04:02
对照组长得好好的，唯独加药组长出一团团黑色的东西，而且做了MTT发现加药组MTT是对照的两倍！...

贴个照片来看看吧。
我们组用的细胞株长菌的话一般不会结成团，还分布的挺均匀。我不知道是不是不同细胞株会有不一样。而且长菌的细胞闻起来会臭臭的……会不会是细胞分泌物啊= =？

我觉得因为有成团物质遮住了光自然读出来的数据就很大，MTT毕竟是以吸光度来作为endpoint的。
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4楼2014-06-06 08:16:52
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-06-06 08:16:52
贴个照片来看看吧。
我们组用的细胞株长菌的话一般不会结成团，还分布的挺均匀。我不知道是不是不同细胞株会有不一样。而且长菌的细胞闻起来会臭臭的……会不会是细胞分泌物啊= =？

我觉得因为有成团物质遮住了 ...

恩，好的，见下图。
用DMSO配制的药物可以直接加到细胞培养基里吗？
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5楼2014-06-06 08:22:29
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-06-06 08:16:52
贴个照片来看看吧。
我们组用的细胞株长菌的话一般不会结成团，还分布的挺均匀。我不知道是不是不同细胞株会有不一样。而且长菌的细胞闻起来会臭臭的……会不会是细胞分泌物啊= =？

我觉得因为有成团物质遮住了 ...

你说的也有道理，但是我用肉眼观察MTT的染色结果就发现加药组要比其对照组的紫色深好多。
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6楼2014-06-06 08:25:19
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sunrq516516

金虫 (小有名气)
细胞形态好……好模糊啊，这是悬浮细胞吗？
如果黑色坨是污染的话，至少不太像细菌污染。
但对照真菌污染也不太像……
http://www.bio1000.com/zt/cell/201453.html

该不会是药物没溶解好吧= =？所以黑色的是药物颗粒？可以在空well里滴加一点溶解了的药物看看是什么样子……
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7楼2014-06-06 10:09:08
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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拉风蜗牛王: 金币+3, ★有帮助 2014-06-06 17:16:01
理论上纯的DMSO对微生物有害，但也不能排除某些耐药菌的存在，如果是污染，最大污染源应该是药物本身。
可能是药物发生物理化学反应。
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8楼2014-06-06 10:25:17
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拉风蜗牛王

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sunrq516516 at 2014-06-06 10:09:08
细胞形态好……好模糊啊，这是悬浮细胞吗？
如果黑色坨是污染的话，至少不太像细菌污染。
但对照真菌污染也不太像……
http://www.bio1000.com/zt/cell/201453.html

该不会是药物没溶解好吧= =？所以黑色的是 ...

好的谢谢您的帮助，也只能这样了！！！
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9楼2014-06-06 17:17:02
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