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cyycsu

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞培养出现问题,样品清洗后能否重复使用已有4人参与

我是做人工骨生物材料的,将样品进行干细胞培养实验几天后,细胞液变得浑浊,无法使用。
请问我将人工骨样品清洗后能否再次使用。
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ventitre

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我不了解你的人工骨,你的样品和干细胞一起培养吗?是贴壁细胞还是悬浮细胞?细胞南培养液混浊是你的样品造成的,还细胞死掉了?对你的样品会有什么影响?这些问题你先搞清楚
药剂
2楼2014-06-05 10:32:22
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yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
你的细胞极大可能是被污染了,你的材料最好彻底灭菌后再使用吧。
以后如果再养细胞,可以考虑一下支原体清除/预防试剂。
支原体是一种大小仅为0.2~0.3 μm,无细胞壁,可透过一般过滤膜(0.22-0.45 μm)的原核生物,在细胞培养过程中,支原体感染发生率达到63%,因而细胞培养过程中被支原体污染是一个世界性的难题。多篇文献研究表明:当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。
    吉锐生物根据自身的经验开发了MycoplasmaOUT™,用于解决因支原体污染而导致细胞污染或状态下降的问题,同时其对于见的革兰氏阴性和阳性菌也有一定的清除作用。从而确保研究人员的研究结果真实、可信。
3楼2014-06-05 13:33:02
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cyycsu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ventitre at 2014-06-05 10:32:22
我不了解你的人工骨,你的样品和干细胞一起培养吗?是贴壁细胞还是悬浮细胞?细胞南培养液混浊是你的样品造成的,还细胞死掉了?对你的样品会有什么影响?这些问题你先搞清楚

谢谢。我们是先培养干细胞,然后将人工骨样品放入培养液中,观察诱导干细胞分化情况。上次实验可能样品不干净,培养液变浑浊,实验没有成功。现在想将上次的人工骨样品清洗杀菌后,重新做实验,想请问样品还能重复使用吗?
4楼2014-06-05 14:33:38
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燕绮

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉人工骨样品不带生物活性的话,可以清洗干净高温灭菌以后再用,我也好奇那个培养液变浑浊,是你看到染菌了,被污染了,有杂质了,还是细胞被人工骨样品作用的。。。
5楼2014-06-06 09:32:03
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ventitre

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cyycsu at 2014-06-05 14:33:38
谢谢。我们是先培养干细胞,然后将人工骨样品放入培养液中,观察诱导干细胞分化情况。上次实验可能样品不干净,培养液变浑浊,实验没有成功。现在想将上次的人工骨样品清洗杀菌后,重新做实验,想请问样品还能重复 ...

我同意楼下的观点,如果不带生物活性你可以考虑重新洗清灭菌。但你在这里说是样品不干净导致培养液混浊,这个说法你确定吗,是不是应该是样品不干净导致细胞死亡才混浊。。。如果只是样品不干净让培养液混浊,你的样品得多不干净。。。个人观点啊。另外有个问题想请教楼主,你们的干细胞是怎么获得的?买的还是实验室自己培养分离的?
药剂
6楼2014-06-06 10:08:56
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baicaikua

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

细胞培养浑浊,基本就是污染了,人工骨应该是可以高压灭菌的,如耐强酸,建议泡酸后用三蒸水冲洗后高压灭菌。
7楼2015-03-03 17:44:41
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