应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » LAMP
161/2返回列表12下一页
查看: 2084  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yilunanxia

金虫 (正式写手)

[求助] LAMP 已有1人参与

小弟最近在做LAMP，可是扩增了几次都是只出现了一条条带，大约3-4kb，请问一般是啥原因啊。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-06-04 20:21:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fwywm

新虫 (初入文坛)
我最近也在做LAMP，情况和你差不多，那是没发生反应吧？还是模板DNA，我也不知道什么原因，楼主现在解决了吗？求指教啊
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-05 11:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fwywm at 2014-06-05 11:10:59
我最近也在做LAMP，情况和你差不多，那是没发生反应吧？还是模板DNA，我也不知道什么原因，楼主现在解决了吗？求指教啊

明天跑一个空白试试。我觉得可能我的酶有问题。
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-05 11:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢伊莹

木虫 (正式写手)
想问一下，你做LAMP有假阳性的情况出现么，怎么避免的呢？
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-21 16:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 谢伊莹 at 2014-07-21 16:43:45
想问一下，你做LAMP有假阳性的情况出现么，怎么避免的呢？

空白对照也是假阳性么？
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-21 20:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢伊莹

木虫 (正式写手)
★ ★
yilunanxia(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-22 20:46:15
引用回帖:
5楼: Originally posted by yilunanxia at 2014-07-21 20:27:39
空白对照也是假阳性么？...

对。我有两套引物，第一次做，设置反应时间45 min，两套都阴；第二次延长至90min，第二套样品阳，空白阴，第一套全阴。然后想重复第二套，就是样品阳，对照也阳了，换了新稀释的引物，新的水，带口罩，戴手套，还是不行，样品阳，对照也阳
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-22 12:52:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 谢伊莹 at 2014-07-22 12:52:39
对。我有两套引物，第一次做，设置反应时间45 min，两套都阴；第二次延长至90min，第二套样品阳，空白阴，第一套全阴。然后想重复第二套，就是样品阳，对照也阳了，换了新稀释的引物，新的水，带口罩，戴手套，还是 ...

我的经验是反应时间90min没问题。对照阳性这个好麻烦，你说水引物 都换了，就还剩他的mix和enzyme了。不行开一套新的试试。我不清楚你做的是啥，我以前做过肠杆菌科的PCR检测，经常出现对照阳性，是因为我用的dd水污染了，然后用水性滤膜过滤就好了。
赞一下 回复此楼
7楼2014-07-22 18:44:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢伊莹

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yilunanxia at 2014-07-22 18:44:05
我的经验是反应时间90min没问题。对照阳性这个好麻烦，你说水引物 都换了，就还剩他的mix和enzyme了。不行开一套新的试试。我不清楚你做的是啥，我以前做过肠杆菌科的PCR检测，经常出现对照阳性，是因为我用的dd水 ...

我做的是食品中的菌，直接做的LAMP，以前做的PCR都是为了获得做LAMP的目的片段序列，dd水是用0.22的膜滤一下么？还想问一下，体系里的mg2+是自己配置的么，用的什么纯度的，分析，色谱？十分感谢~
赞一下 回复此楼
8楼2014-07-23 22:58:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yilunanxia

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 谢伊莹 at 2014-07-23 22:58:55
我做的是食品中的菌，直接做的LAMP，以前做的PCR都是为了获得做LAMP的目的片段序列，dd水是用0.22的膜滤一下么？还想问一下，体系里的mg2+是自己配置的么，用的什么纯度的，分析，色谱？十分感谢~...

那你要考虑一个问题是水里是否也有可能有这种菌，如果有就用无菌的0.22的滤膜过滤。体系这个按照说明书来吧（如果你用的试剂盒），我当时用的试剂盒，所以就没在意。真的需要额外添加Mg的话你可以从TaKaRa买啊。为啥自己配。。。。
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-23 23:38:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢伊莹

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by yilunanxia at 2014-07-23 23:38:54
那你要考虑一个问题是水里是否也有可能有这种菌，如果有就用无菌的0.22的滤膜过滤。体系这个按照说明书来吧（如果你用的试剂盒），我当时用的试剂盒，所以就没在意。真的需要额外添加Mg的话你可以从TaKaRa买啊。为 ...

我是自己构建试剂盒，自己摸索体系，水已经灭过菌了，但是DNA还是会存在，都没办法了，整个换体系花钱又多，唉~
赞一下 回复此楼
10楼2014-07-24 11:21:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 爱与家庭2 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:08 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭