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[交流]
关于聚丙烯酰胺凝胶电泳
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最近实验出了一些问题 我做的是核酸DNA的，请问聚丙烯酰胺溶液的浓度比例如何？跑胶时电压去多少？用预电泳吗？是不是开始时要先大电压激发？还有为什么做胶（6%）时上面插孔处的溶液不易聚合呢？这样上样很不容易，而且易混带，溴芬兰跑着跑着就没有了？ 后来换成浓度为20%的聚丙烯酰胺凝胶，插梳子的地方不凝结，无法形成胶孔，下面都凝结的很好，请教一下原因 电泳的时候可能胶浓度太大，我用120v电压才只有十几，功率也达不到，溴芬兰不跑动，？？？？？ 好想赶快做完实验啊！ 不胜感激，！谢谢谢！ [search]聚丙烯酰胺[/search] |
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你好！ 首先，你要问的是不是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，聚丙烯酰胺凝胶溶液的浓度比例要看你加的样品中蛋白分子量大概多少，具体的信息有点忘了，有一本书《聚丙烯酰胺凝胶电泳》上有相关内容，你可以看看。（2）跑胶时可以用恒定电压或电泳，我跑电泳时，用的是恒定电流，开始时10mA-15mA,当溴芬蓝跑过浓缩胶和分离胶界面时，将电流20mA-30mA（3）不需要用预电泳（4）做胶时上面插孔处的溶液不易聚合的原因可能是胶的比例不对，或是玻璃不干净。后来换成浓度为20%的聚丙烯酰胺凝胶，插梳子的地方不凝结，无法形成胶孔，下面都凝结的很好，请教一下原因 电泳的时候可能胶浓度太大，我用120v电压才只有十几，功率也达不到，溴芬兰不跑动，可能电阻太大。或是样品盐度过高。 |
2楼2008-03-20 20:26:00
3楼2008-03-20 20:27:36
xiaoyuan622
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