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diqilvyinyun

银虫 (初入文坛)

[求助] 重组质粒转入BL21后,平板可以长,但挑单克隆菌摇不起来 已有11人参与

多次尝试,不是挑没挑上的问题,不是抗生素的问题,不是培养基的问题;
也曾做实验,同一管子里的菌取一些用于摇菌,取一些涂平板,过夜培养,平板长菌,试管菌还是没有要起来;
过夜摇菌后培养基呈类似悬浊液,图片如下:
求大神指教,还有是否有人也遇到过类似情况,望指点一二,以助小弟走出困境。

重组质粒转入BL21后,平板可以长,但挑单克隆菌摇不起来
IMG_2850.JPG


重组质粒转入BL21后,平板可以长,但挑单克隆菌摇不起来-1
IMG_2852.JPG

左边为无菌培养基,右边为过夜摇菌后的菌液;
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为梦想而努力!
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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确定是噬菌体污染。
噬菌体对于平板上的菌影响不大,但是对于液体的菌影响比较大,过夜培养就呈现你这种状况的悬浊液,那是菌体裂解了,如果观察仔细,会发现,被噬菌体污染的菌,先长到一定浓度,然后裂解成菌体聚集的絮状物。这种状态通常发生在春季和夏季。
解决方案:
1、实验室过夜灭菌(紫外、甲醛、臭氧灭菌)。
2、噬菌体污染的培养基,发现及时灭菌。
3、对于你这个实验,你可以从平板上多挑几个菌落,通常情况下,不是所有的菌落都被污染了,我遇到过挑10个菌,有2-5个是污染的。所以多挑几个会挑到没有污染的。

夏天做实验要控制好,实验室空调调到26度,注意通风,保持卫生是关键。

有问题再交流。
16楼2014-06-04 09:31:37
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dongbinbin89

金虫 (初入文坛)

idoubind

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定不是培养基的问题?怎么知道的

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-06-02 09:01:58
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diqilvyinyun

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dongbinbin89 at 2014-06-02 09:01:58
你确定不是培养基的问题?怎么知道的

同样的培养基,同时摇菌,接的别的菌正常摇出,没有任何问题
为梦想而努力!
3楼2014-06-02 09:07:44
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miao1991

新虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

4楼2014-06-02 12:43:46
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