24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

diqilvyinyun

银虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 359.3
帖子: 32
在线: 36.8小时
虫号: 1845424
注册: 2012-06-03
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 重组质粒转入BL21后，平板可以长，但挑单克隆菌摇不起来已有11人参与

多次尝试，不是挑没挑上的问题，不是抗生素的问题，不是培养基的问题；
也曾做实验，同一管子里的菌取一些用于摇菌，取一些涂平板，过夜培养，平板长菌，试管菌还是没有要起来；
过夜摇菌后培养基呈类似悬浊液，图片如下：
求大神指教，还有是否有人也遇到过类似情况，望指点一二，以助小弟走出困境。

IMG_2850.JPG

IMG_2852.JPG

左边为无菌培养基，右边为过夜摇菌后的菌液；

回复此楼

» 猜你喜欢

为梦想而努力！

1楼 2014-06-02 08:45:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dulei

木虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 8 (幼儿园)
金币: 1426.9
散金: 1257
红花: 2
帖子: 209
在线: 74.5小时
虫号: 593568
注册: 2008-09-05
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

确定是噬菌体污染。
噬菌体对于平板上的菌影响不大，但是对于液体的菌影响比较大，过夜培养就呈现你这种状况的悬浊液，那是菌体裂解了，如果观察仔细，会发现，被噬菌体污染的菌，先长到一定浓度，然后裂解成菌体聚集的絮状物。这种状态通常发生在春季和夏季。
解决方案：
1、实验室过夜灭菌（紫外、甲醛、臭氧灭菌）。
2、噬菌体污染的培养基，发现及时灭菌。
3、对于你这个实验，你可以从平板上多挑几个菌落，通常情况下，不是所有的菌落都被污染了，我遇到过挑10个菌，有2-5个是污染的。所以多挑几个会挑到没有污染的。

夏天做实验要控制好，实验室空调调到26度，注意通风，保持卫生是关键。

有问题再交流。