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286953587铁虫 (小有名气)
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乳粉烟酰胺为什么出峰不一致？
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刚开始接触乳粉烟酰胺分析实验，按照国标5413方法，我的前处理是：称取5g样品，加猪胰酶，适量水，酶解2h。。取出用盐酸（1+9）大约调至ph1.7，涡匀，用6M氢氧化钠调节pH约4.5-6.0（因ph试纸，无法精确至4.5，只是看到乳粉蛋白质产生沉淀），定容，过滤头，上机。 标准溶液：用水配烟酸、烟酰胺混合标各300ppm，临用前，水稀释10配，用水配成5个梯度点，进样。 柱子：C18，pDA检测器，提取261nm波长 可能是柱子原因，按照国标流动相“甲醇70 mL，异丙醇20 mL，庚烷磺酸钠1 g，用910 mL水溶解并混 匀后，用高氯酸调pH至2.1 ± 0.1，经0.45 μm膜过滤。”感觉峰分不开； 后来改用“0.61g庚烷磺酸钠，水定容500mL，磷酸调ph约3.0”-甲醇，梯度如下图。 跑样后，发现样品和标准点出峰时间对不上，经过pDA光谱比对发现两个峰应该是同一种物质。 后来分别用样品液加了不同浓度的标液跑，发现加标样出峰跟标准点对不上，且有加标量不同时，其出峰时间差异亦有不同的倾向。。。 四个不同样品出峰时间一致，几个不同浓度标准点出峰时间一致。。 图谱见下图 请问好友这可能是什么原因？ 要怎样去排查原因？ 这样出峰有差异情况下直接定量行不行？如果不行要怎么来定量？ 解决这个问题可能有什么办法？（改柱子就免了，因为经济不充裕） 烦请好友帮帮忙谢谢。。。  流动相梯度.jpg  C360_2014-05-30-21-01-46-735_org.jpg  C360_2014-05-30-21-03-40-214.jpg |
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铁虫 (小有名气)
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4楼2014-06-02 09:18:01
