| 查看: 567 | 回复: 3 | ||
286953587铁虫 (小有名气)
|
[求助]
乳粉烟酰胺为什么出峰不一致？
|
|
刚开始接触乳粉烟酰胺分析实验，按照国标5413方法，我的前处理是：称取5g样品，加猪胰酶，适量水，酶解2h。。取出用盐酸（1+9）大约调至ph1.7，涡匀，用6M氢氧化钠调节pH约4.5-6.0（因ph试纸，无法精确至4.5，只是看到乳粉蛋白质产生沉淀），定容，过滤头，上机。 标准溶液：用水配烟酸、烟酰胺混合标各300ppm，临用前，水稀释10配，用水配成5个梯度点，进样。 柱子：C18，pDA检测器，提取261nm波长 可能是柱子原因，按照国标流动相“甲醇70 mL，异丙醇20 mL，庚烷磺酸钠1 g，用910 mL水溶解并混 匀后，用高氯酸调pH至2.1 ± 0.1，经0.45 μm膜过滤。”感觉峰分不开； 后来改用“0.61g庚烷磺酸钠，水定容500mL，磷酸调ph约3.0”-甲醇，梯度如下图。 跑样后，发现样品和标准点出峰时间对不上，经过pDA光谱比对发现两个峰应该是同一种物质。 后来分别用样品液加了不同浓度的标液跑，发现加标样出峰跟标准点对不上，且有加标量不同时，其出峰时间差异亦有不同的倾向。。。 四个不同样品出峰时间一致，几个不同浓度标准点出峰时间一致。。 图谱见下图 请问好友这可能是什么原因？ 要怎样去排查原因？ 这样出峰有差异情况下直接定量行不行？如果不行要怎么来定量？ 解决这个问题可能有什么办法？（改柱子就免了，因为经济不充裕） 烦请好友帮帮忙谢谢。。。  流动相梯度.jpg  C360_2014-05-30-21-01-46-735_org.jpg  C360_2014-05-30-21-03-40-214.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
人气不行了
已经有9人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有6人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有5人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有21人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有16人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有21人回复
-
估计是周四
已经有4人回复
-
我面上完蛋了
已经有9人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助/交流】请问NAD贵不贵啊（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）
已经有15人回复
286953587
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2.8
- 散金: 5
- 帖子: 251
- 在线: 56.6小时
- 虫号: 1471358
- 注册: 2011-11-01
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2014-05-31 21:59:39
 |
3楼2014-06-01 12:26:07
|
。。。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
4楼2014-06-02 09:18:01
20