应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请问在细胞外面有mRNA吗？
53/1返回列表
查看: 1949  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请问在细胞外面有mRNA吗？ 已有5人参与

做了一个基因在细胞中的表达量测定，收细胞时用PBS冲洗细胞三次，并将第三次的洗脱液收集起来，然后对所收集的细胞和第三次的洗脱液提RNA，反转录后进行表达量测定，结果发现洗脱液中也有该基因的表达量，而且也不低。。。所以现在我不确定是不是细胞外也会存在mRNA呢？   请教各位了~~~谢谢大家~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
1楼 2014-05-31 18:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by anmengqu at 2014-06-01 08:35:02
弄破了的话，RNA应该很容易被降解了。
...

确实没有想象的那么容易降解，年初-80冰箱坏了两天，温度都快成零上了，结果这次反转录发现RNA还好着呢
赞一下 回复此楼
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
22楼2014-06-04 20:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-31 21:55:13
你那不像是细胞外液中存在mRNA。
你PBS洗了3遍，收集的是第3遍，而且还表达量不低。
我们的话，叫做H2O都P出条带了。重新实验，把能换的都换了。我们实验室就有人把酶都污染了，然后一直是H2O都P出条带。
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-31 18:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-31 18:55:11
你那不像是细胞外液中存在mRNA。
你PBS洗了3遍，收集的是第3遍，而且还表达量不低。
我们的话，叫做H2O都P出条带了。重新实验，把能换的都换了。我们实验室就有人把酶都污染了，然后一直是H2O都P出条带。

我用的荧光定量测定它的表达量，测出来洗脱液中和细胞中的表达量基本就差不多，我明白你说的意思，你是说洗脱液中还有目的基因，所以就会P出条带。但是用荧光定量分析的话洗脱液中的基因含量再高他也不应该比细胞中的基因含量高吧？所以我很费解。。。
赞一下 回复此楼
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
3楼2014-05-31 20:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流 2014-05-31 22:44:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohaixie at 2014-05-31 20:49:14
我用的荧光定量测定它的表达量，测出来洗脱液中和细胞中的表达量基本就差不多，我明白你说的意思，你是说洗脱液中还有目的基因，所以就会P出条带。但是用荧光定量分析的话洗脱液中的基因含量再高他也不应该比细胞中 ...

按照你这样的流程，洗脱液里面是不太可能有mRNA。而且洗脱液反转录后，做实时定量和细胞中差不多，这就更不可能了啊。
建议你检查实验过程，是不是污染了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-31 20:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 18/900 2026-08-25 14:50 by Weed114114
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 +4 ziyangfang 2026-08-25 4/200 2026-08-25 14:41 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +12 CrisMessi 2026-08-18 13/650 2026-08-25 14:40 by ZJTJZ
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +19 羊腰板 2026-08-21 22/1100 2026-08-25 10:38 by popular289
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +5 process2012 2026-08-23 7/350 2026-08-25 09:42 by huixian257
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭