应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请问在细胞外面有mRNA吗？
51/1返回列表
查看: 1722  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)

[求助] 请问在细胞外面有mRNA吗？ 已有5人参与

做了一个基因在细胞中的表达量测定，收细胞时用PBS冲洗细胞三次，并将第三次的洗脱液收集起来，然后对所收集的细胞和第三次的洗脱液提RNA，反转录后进行表达量测定，结果发现洗脱液中也有该基因的表达量，而且也不低。。。所以现在我不确定是不是细胞外也会存在mRNA呢？   请教各位了~~~谢谢大家~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
1楼 2014-05-31 18:49:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流 2014-05-31 22:44:45
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaohaixie at 2014-05-31 20:49:14
我用的荧光定量测定它的表达量，测出来洗脱液中和细胞中的表达量基本就差不多，我明白你说的意思，你是说洗脱液中还有目的基因，所以就会P出条带。但是用荧光定量分析的话洗脱液中的基因含量再高他也不应该比细胞中 ...

按照你这样的流程，洗脱液里面是不太可能有mRNA。而且洗脱液反转录后，做实时定量和细胞中差不多，这就更不可能了啊。
建议你检查实验过程，是不是污染了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-31 20:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-31 21:55:13
你那不像是细胞外液中存在mRNA。
你PBS洗了3遍，收集的是第3遍，而且还表达量不低。
我们的话，叫做H2O都P出条带了。重新实验，把能换的都换了。我们实验室就有人把酶都污染了，然后一直是H2O都P出条带。
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-31 18:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-31 18:55:11
你那不像是细胞外液中存在mRNA。
你PBS洗了3遍，收集的是第3遍，而且还表达量不低。
我们的话，叫做H2O都P出条带了。重新实验，把能换的都换了。我们实验室就有人把酶都污染了，然后一直是H2O都P出条带。

我用的荧光定量测定它的表达量，测出来洗脱液中和细胞中的表达量基本就差不多，我明白你说的意思，你是说洗脱液中还有目的基因，所以就会P出条带。但是用荧光定量分析的话洗脱液中的基因含量再高他也不应该比细胞中的基因含量高吧？所以我很费解。。。
赞一下 回复此楼
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
3楼2014-05-31 20:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaixie

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-31 20:52:59
按照你这样的流程，洗脱液里面是不太可能有mRNA。而且洗脱液反转录后，做实时定量和细胞中差不多，这就更不可能了啊。
建议你检查实验过程，是不是污染了。...

做定量用的水和mix是新的不会有问题，因为做的是绝对的荧光定量，标准曲线很好，应该能看出引物也不会有问题。现在只剩下我的待测样品了，有没有可能是我反转录的时候就没弄好，反转录失败，全是mRNA，然后不论是细胞还是洗脱液中都含有少量的DNA，结果就使得细胞和洗脱液中的表达量一致了？
赞一下 回复此楼
Thehardyouwork,theluckyyouwill.年轻就要多吃苦
5楼2014-05-31 21:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +6 NIFFFfff 2026-03-20 6/300 2026-03-24 21:02 by hello七七
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗？ +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 291 求调剂 +4 化工2026届毕业� 2026-03-21 5/250 2026-03-23 16:46 by 化工2026届毕业�
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭