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fangxinyu

新虫 (初入文坛)

[求助] 大鼠神经内提取RNA的问题

我做的这个实验需要从损伤的大鼠坐骨神经中检测基因的表达,用的生工的柱式trizol法提取的,但是提取的结果不理想。
主要问题有:1 样品量太少,在研钵中研磨后,粉末都快看不见了,只好直接将trizol加入研钵中匀浆。
2 检测的RNA浓度较低 Q5000测得:大鼠神经内提取RNA的问题
3逆转录后测CDNA浓度2000ng/ul左右,但是这个应该没有什么意义吧,因为杂质太多了。
大鼠神经内提取RNA的问题-1
3因为我想做的是cybergreen的半定量PCR,就直接用这个试剂在普通pcr机上跑了,用内参GAPDH P的,看到这样的结果:
大鼠神经内提取RNA的问题-2左边是50bpmarker,右边是2000-100的marker,这个产物是引物二聚体还是什么?

请问这样的情况,还有什么好的提取组织RNA的方法,或者RNA是否需要提纯?
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fangxinyu

新虫 (初入文坛)

自己顶一下,没有人回答么
2楼2014-05-30 09:12:56
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fangxinyu

新虫 (初入文坛)

自己再顶。。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-05-30 14:57:37
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