应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于pcr条带的问题,请虫高手们帮忙
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 661  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

[交流] 关于pcr条带的问题,请虫高手们帮忙

我的目的片段大小为900bp左右，
模板是含有目的基因的酵母细胞.用Taq酶扩增后目的1000--2000bp的非目的条带清晰，非特异性条带大小不一，但是很亮；
上游引物30bp,下游引物48bp.都带有酶切位点.
  请大家帮忙分析一下是什么原因，引物是否有问题？谢谢！
[search]pcr[/search]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-03-19 17:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangda29

新虫 (初入文坛)
是不是可以换个酶试试！可能酶的特异性不好！
我用的是KOD-PLUS ,特异性很好！
赞一下 回复此楼
8楼2008-03-26 13:31:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Sunnywhitebf

铜虫 (初入文坛)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
提高一下退火温度再扩增一下试试，要不就是引物设计的特异性不够好，重新设计引物
赞一下(10人) 回复此楼
2楼2008-03-19 19:15:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
二楼说的不错，如果有条件可以用touchdown PCR试试。
赞一下(10人) 回复此楼
细推物理须行乐。
3楼2008-03-19 22:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biocore

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
引用回帖:
Originally posted by bijiaoyingyang at 2008-3-19 17:49:
我的目的片段大小为900bp左右，
模板是含有目的基因的酵母细胞.用Taq酶扩增后目的1000--2000bp的非目的条带清晰，非特异性条带大小不一，但是很亮；
上游引物30bp,下游引物48bp.都带有酶切位点.
  请大家帮忙分 ...

呵呵，看看Taq酶有没有问题，以前我用过国产的Taq，菲特异性蛮强。
你30bp，和48bp的引物，和模板结合的序列是多少碱基？
如果结合的不多，菲特异性扩增也很多。
赞一下(10人) 回复此楼
4楼2008-03-19 22:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +9 jhybd 2026-03-23 14/700 2026-03-29 21:11 by 3Strings
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-29 3/150 2026-03-29 12:06 by longlotian
[考研] 332求调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 海纳百川Ly 2026-03-29 5/250 2026-03-29 09:57 by Sjndkwm
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 材料与化工考研调剂 +17 孅華 2026-03-22 17/850 2026-03-28 08:35 by WYUMater
[考研] 291求调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-28 04:02 by fmesaito
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭