24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 666  |  回复: 9
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

[交流] 关于pcr条带的问题,请虫高手们帮忙

我的目的片段大小为900bp左右,
模板是含有目的基因的酵母细胞.用Taq酶扩增后目的1000--2000bp的非目的条带清晰,非特异性条带大小不一,但是很亮;
上游引物30bp,下游引物48bp.都带有酶切位点.
  请大家帮忙分析一下是什么原因,引物是否有问题?谢谢!
[search]pcr[/search]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biocore


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
引用回帖:
Originally posted by bijiaoyingyang at 2008-3-19 17:49:
我的目的片段大小为900bp左右,
模板是含有目的基因的酵母细胞.用Taq酶扩增后目的1000--2000bp的非目的条带清晰,非特异性条带大小不一,但是很亮;
上游引物30bp,下游引物48bp.都带有酶切位点.
  请大家帮忙分 ...

呵呵,看看Taq酶有没有问题,以前我用过国产的Taq,菲特异性蛮强。
你30bp,和48bp的引物,和模板结合的序列是多少碱基?
如果结合的不多,菲特异性扩增也很多。
4楼2008-03-19 22:19:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Sunnywhitebf

铜虫 (初入文坛)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
提高一下退火温度再扩增一下试试,要不就是引物设计的特异性不够好,重新设计引物
2楼2008-03-19 19:15:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
二楼说的不错,如果有条件可以用touchdown PCR试试。
细推物理须行乐。
3楼2008-03-19 22:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liumikewolf

金虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
可能与镁离子浓度过高有关
5楼2008-03-20 15:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +9 Koxui 2026-03-28 9/450 2026-03-29 20:43 by 无际的草原
[考研] 296求调剂 +6 彼岸t 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:22 by 永字号
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 321求调剂 +6 Ymlll 2026-03-24 6/300 2026-03-26 20:50 by 不吃魚的貓
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
请填处理意见