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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RAPD分子标记
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心月之星

新虫 (初入文坛)

[求助] RAPD分子标记 已有3人参与

最近做RAPD分子标记，但都只出现一条条带，不知道是什么原因？
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1楼 2014-05-27 20:09:21
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
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心月之星(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:11:15
多态性效果不好！
1引物时间过长，已降解
2所用材料DNA降解严重，或提取效果不好
3RAPD重现性比较差
4DNA最好稀释到50ng/ul
5建议优化条件，或者换试剂进行PCR
赞一下 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-05-27 20:19:20
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小虫s

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
心月之星(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-27 21:11:24
1.优化一下退火温度，
2.检查一下引物质量，是否是引物本身有问题
3.重新筛选一些新的引物，可能有些引物就是不适宜
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-27 20:20:45
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些随机引物本身就只能扩增一条带，甚至会出现没有条带的现象。你换下模板试试。
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学习使你立于不败之地
4楼2014-05-28 17:57:01
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心月之星

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-05-28 17:57:01
有些随机引物本身就只能扩增一条带，甚至会出现没有条带的现象。你换下模板试试。

我试一下，谢谢
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5楼2014-06-05 11:09:09
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