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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 分子量接近，电荷接近的蛋白质怎么分离开来？
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)

[求助] 分子量接近，电荷接近的蛋白质怎么分离开来？ 已有4人参与

分子量接近，电荷接近的蛋白质怎么分离开来？求各位大侠指教啊
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1楼 2014-05-27 16:30:09
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-06-04 13:01:18
如果要看是不是两种酶或者一种酶，你可以跑一个长的分子筛，然后收集样品峰进行酶活测定。

老板说让跑天然电泳试试，天然电泳是不是也算一种分子筛？
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14楼2014-06-08 10:13:46
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑长胶，越长越好

双向电泳
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天行健
2楼2014-05-27 17:03:58
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younghe

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
笑笑打dota: 金币+5, ★有帮助 2014-10-11 17:08:58
纯化么，可以用疏水柱子，两个蛋白的疏水性应该不一样，可以试试，有时候PI相近的蛋白液可以在离子交换上面分开来，因为局部电荷分布不一样。
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3楼2014-05-29 10:34:52
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by younghe at 2014-05-29 10:34:52
纯化么，可以用疏水柱子，两个蛋白的疏水性应该不一样，可以试试，有时候PI相近的蛋白液可以在离子交换上面分开来，因为局部电荷分布不一样。

先用DEAE离子交换层析，跑出一个有活性的峰，收集酶液跑RsourceQ离子交换层析有两个相近的有活性的峰，再收集跑superdex 200又是一个有活性的大峰，然后不知道怎么分离了
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4楼2014-05-29 10:54:49
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