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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒的提取
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yumupeipei

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒的提取 已有3人参与

麻烦各位前辈看一下这张质粒电泳图，途中marker为DL10，000，2-13泳道为质粒电泳情况。为何各泳道的条带不一致？PS：所有的质粒大小均为7，000bp，但是最后电泳的结果却如图所示，不知道能不能够用，现在正用双酶切对其进行鉴定，希望各位能够给我指点，谢谢

质粒的提取
2014-5-27 质粒电泳.jpg
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1楼 2014-05-27 15:43:17
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 18:55:02
出现此现象原因：
1 电泳的胶浓度过大，条带越长，建议0.7%的胶
2 胶凝固时间不到
3 挑单克隆可能污染
4 质粒是环状的，在胶中跑的速度很快，这是可能出现的情况，建议酶切2h后在电泳看看结果吧
5 建议涂板加入x-gal 挑取白色单克隆，楼主挑的单克隆可能不对
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-05-27 16:09:35
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 18:55:09
如果你知道单酶切位点，做个单酶切鉴定下就知道大小对不对了

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3楼2014-05-27 16:11:59
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 18:55:17
质粒没有大小的  酶切以后才知道  大胆进行下一步实验   酶切一下 如果是对的 他们就跑到一条带上面去了
赞一下(2人) 回复此楼
借口很贱，，，
4楼2014-05-27 17:00:52
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