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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 为什么提取RNA时出现一坨白色沉淀
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胖墩儿Adolph

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2014-06-13 09:38:04
什么情况？我每次提取RNA都会有白色沉淀啊，难道那个白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥时候干燥时间太久了，前3个管子里面的白色沉淀居然不见了，变成透明的了，求原因！！！！是不是被降解了？难道白做了？ ...

我也遇到这个情况了，但是我硬着头皮反转录，PCR了一下，出来了所需要的基因，而且内参Cq 16，其他都很好。干燥太久就得好好吹一吹，让RNA 溶解
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我不爱上课，但很爱学习！
21楼2014-06-13 14:22:36
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 胖墩儿Adolph at 2014-06-13 14:22:36
我也遇到这个情况了，但是我硬着头皮反转录，PCR了一下，出来了所需要的基因，而且内参Cq 16，其他都很好。干燥太久就得好好吹一吹，让RNA 溶解...

谢谢！我就盖上盖子使劲上下晃动了一会，希望没事吧，下周一开始PCR扩增，希望结果满意。祈祷中。。。
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22楼2014-06-13 20:44:36
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园园补补

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by anmengqu at 2014-05-31 09:22:47
应该是有蛋白的沉淀，我以前在做RNA提取的时候，一旦出现白色沉淀过多一般情况下RNA提出了的质量都不好。用氯仿再多抽提一次，但要保证操作要访RNA酶，因为每多操作一次就增加一分被污染的危险，不要到最后蛋白除掉 ...

原因找到了，是trizol试剂被污染了，现在好了
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23楼2014-06-14 10:14:26
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园园补补

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2014-06-13 09:38:04
什么情况？我每次提取RNA都会有白色沉淀啊，难道那个白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥时候干燥时间太久了，前3个管子里面的白色沉淀居然不见了，变成透明的了，求原因！！！！是不是被降解了？难道白做了？ ...

有白色沉淀很正常啊，我的是很明显的一坨白色絮状物的沉淀，很显然我的不是想要得到的RNA白色沉淀
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24楼2014-06-14 10:16:06
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huanzhizhu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
19楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2014-06-13 09:38:04
什么情况？我每次提取RNA都会有白色沉淀啊，难道那个白色沉淀不是RNA？？？？最近一次提取干燥时候干燥时间太久了，前3个管子里面的白色沉淀居然不见了，变成透明的了，求原因！！！！是不是被降解了？难道白做了？ ...

同感，基本每次提取RNA都会出现某些管子白色沉淀，看了此楼瞬间表示伤不起！
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25楼2014-06-14 11:31:26
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by 园园补补 at 2014-06-14 10:16:06
有白色沉淀很正常啊，我的是很明显的一坨白色絮状物的沉淀，很显然我的不是想要得到的RNA白色沉淀...

这是什么个意思？难道那白色沉淀不是RNA？那是什么杂质？
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26楼2014-06-14 11:38:18
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by huanzhizhu at 2014-06-14 11:31:26
同感，基本每次提取RNA都会出现某些管子白色沉淀，看了此楼瞬间表示伤不起！...

额额，伤不起是什么个情况嘛？难道白色沉淀不是RNA？越是没有表示越纯？瞬间凌乱了。。。。反正我前三个管子在弃上清时候发现有一坨白色沉淀，干燥时候没有及时观察，干燥的久了一些，我一看，里面东西没有了，变透明了，吓了我一跳，目测这三管不大好溶解啊，后面几组就及时溶解了，后天跑PCR，希望结果良好。
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27楼2014-06-14 11:44:08
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曼舞流苏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by huanzhizhu at 2014-06-14 11:31:26
同感，基本每次提取RNA都会出现某些管子白色沉淀，看了此楼瞬间表示伤不起！...

刚接触做PCR，求耐心指教，不要鄙视偶的无知，谢谢！
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28楼2014-06-14 11:51:19
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园园补补

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
26楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2014-06-14 11:38:18
这是什么个意思？难道那白色沉淀不是RNA？那是什么杂质？...

我的是一坨白色絮状沉淀，测出来的比值不是很对，我的应该不是RNA
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29楼2014-06-16 09:45:22
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as321616

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
园园补补(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-12 20:31:54
以前遇到过这种问题。这样处理，加入氯仿离心分层后，吸取上清需要小心，不要吸到中层白色的东西或下层红色有机相，否则pellet会有不溶于水的白色沉淀。如果楼主不介意提取量，取一部分上清就可以了，剩下的不要，这样可以避免蛋白或多糖污染。用这种方法，260/230 一般都能到1.9以上。
希望能帮到。
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30楼2014-06-16 13:20:47
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