| 查看: 6642 | 回复: 39 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
园园补补铁虫 (小有名气)
|
[求助]
为什么提取RNA时出现一坨白色沉淀 已有13人参与
|
|||
| 提取RNA快一年时间了，之前提取效果一直很好，可是近两次却出现了出题：用Trizol提取RNA，加入异丙醇离心后就会出现一坨白色沉淀，用75%乙醇洗涤沉淀离心后依旧有很明显的白色沉淀，检测的A260/A280比值低于1.8，A260/A230比值低于2.0，（之前的实验没有出现过很明显的白色沉淀，而且A260/A280和A260/A230比值都很正常）。。。很困惑，实验没办法进行了。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有156人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
yanshumo
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 164.8
- 散金: 10
- 帖子: 15
- 在线: 19.8小时
- 虫号: 2676414
- 注册: 2013-09-24
- 性别: GG
- 专业: 中药学
35楼2014-12-04 14:36:22
飞约疯人院
专家顾问 (著名写手)
科学怪人
-
专家经验: +140 - MolEPI: 2
- 应助: 308 (大学生)
- 金币: 1099.5
- 散金: 8294
- 红花: 65
- 沙发: 5
- 帖子: 1996
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 3188421
- 注册: 2014-05-07
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 19:04:44
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-05-27 19:04:44
|
楼主，请仔细看下我们的步骤： 按照TRizol一步法制备总RNA，其步骤简述如下：取膜荚黄芪的叶片500 mg，于液氮预冷的研钵中，液氮速冻后充分研磨成粉末，加入到加有5 mL TRizol的15 mL离心管中，混匀，室温放置5 min，使其充分裂解12 000 rpm，离心5 min，弃沉淀。加入1mL氯仿，震荡混和均匀后放于冰上15 min，于4 ℃，12000 rpm 离心15min。取上清液到新的离心管中，加入等量体积异丙醇，颠倒混合均匀，-20℃ 放置20 min以上，4 ℃，12 000 rpm离心10 min。去上清，加入5 mL 75 %冰乙醇，悬浮沉淀，4℃，12 000 rpm离心5 min，去上清，重复2次。在室温阴凉处空气干燥或真空干燥RNA沉淀。加入50 μL DEPC H2O溶解RNA，将抽提好的总RNA 保存于-70 ℃冰箱中。 |
2楼2014-05-27 14:43:40
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2014-05-27 15:13:23
园园补补
铁虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1324.7
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 237
- 在线: 56.3小时
- 虫号: 1662277
- 注册: 2012-03-03
- 性别: MM
- 专业: 生物信息学
4楼2014-05-28 09:34:37
100