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shuangzi8761银虫 (著名写手)
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关于水稻RNAi载体pHANNIBAL双酶切的问题请教已有1人参与
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小弟最近做水稻RNAi，用pHANNIBAL构建中间载体，pCAMBIA1300做表达载体，正反片段为200bp，选择插入位点正向为EcoR1&Xho1,反向为Hind3&Xba1, 两个载体连接选用Pst1和Sac1。问题在用Pst1和Sac1双酶切pHANNIBAL时，电泳出现了四条带。。。。。。双酶切后应该为3300bp大小。。。这两个酶在载体上都是单一的酶切位点，为何出现了四条带。。。。插入的RNAi基因片段上也没有这俩酶切位点啊，非常奇怪，请各位虫友指点一二。。。不胜感谢 电泳图第一泳道为PLUS2的maker,从上到下为8k 5k 3k 2k 1k 750bP 500bp 250bp 100bp 第二泳道为pCAMBIA1300的Pst1和Sac1双酶切 第三泳道为pHANNIBAL的Pst1和Sac1双酶切 图为pHANNIBAL图谱  pHANNIBAL_1x.png  QH{@5SM__]Q[W3TUZX7O5CV.jpg |
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4楼2014-05-26 09:50:42
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