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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 做凋亡,收集细胞为什么必须是不含EDTA的胰酶?

试剂盒的说明书里用的不含EDTA胰酶。为什么?
而我一直用的是浙江吉诺的gibco trypsin干粉配的现成胰酶液,标注不含钙、镁。是含不含EDTA?
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silicare

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【答案】应助回帖

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我听五月天: 金币+8 2014-05-27 11:29:40
要看你用流式检测什么,EDTA可以螯合掉细胞膜上的钙离子,胰酶的EDTA都是后加的,有没有直接问生产厂家就可以了
2楼2014-05-26 11:20:10
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我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2014-05-26 11:20:10
要看你用流式检测什么,EDTA可以螯合掉细胞膜上的钙离子,胰酶的EDTA都是后加的,有没有直接问生产厂家就可以了

用annexin-V-FITC/PI检测凋亡啊,有些试剂盒说不含EDTA的胰酶,有些试剂盒没有提什么胰酶~额~晕
为爱而生
3楼2014-05-26 13:08:55
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silicare

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-26 13:08:55
用annexin-V-FITC/PI检测凋亡啊,有些试剂盒说不含EDTA的胰酶,有些试剂盒没有提什么胰酶~额~晕...

做AV/PI肯定是不能用EDTA了,Annexin V是依赖钙离子的,EDTA螯合钙离子会影响其结合
4楼2014-05-26 13:25:28
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我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by silicare at 2014-05-26 13:25:28
做AV/PI肯定是不能用EDTA了,Annexin V是依赖钙离子的,EDTA螯合钙离子会影响其结合...

总算涨姿势了!!!谢谢
为爱而生
5楼2014-05-27 11:29:20
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