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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 做凋亡，收集细胞为什么必须是不含EDTA的胰酶？
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 做凋亡，收集细胞为什么必须是不含EDTA的胰酶？

试剂盒的说明书里用的不含EDTA胰酶。为什么？
而我一直用的是浙江吉诺的gibco trypsin干粉配的现成胰酶液，标注不含钙、镁。是含不含EDTA？
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为爱而生
1楼 2014-05-25 10:19:00
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2014-05-26 11:20:10
要看你用流式检测什么，EDTA可以螯合掉细胞膜上的钙离子，胰酶的EDTA都是后加的，有没有直接问生产厂家就可以了

用annexin-V-FITC/PI检测凋亡啊，有些试剂盒说不含EDTA的胰酶，有些试剂盒没有提什么胰酶~额~晕
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为爱而生
3楼2014-05-26 13:08:55
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silicare

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【答案】应助回帖

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我听五月天: 金币+8 2014-05-27 11:29:40
要看你用流式检测什么，EDTA可以螯合掉细胞膜上的钙离子，胰酶的EDTA都是后加的，有没有直接问生产厂家就可以了
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2楼2014-05-26 11:20:10
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silicare

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-26 13:08:55
用annexin-V-FITC/PI检测凋亡啊，有些试剂盒说不含EDTA的胰酶，有些试剂盒没有提什么胰酶~额~晕...

做AV/PI肯定是不能用EDTA了，Annexin V是依赖钙离子的，EDTA螯合钙离子会影响其结合
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4楼2014-05-26 13:25:28
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by silicare at 2014-05-26 13:25:28
做AV/PI肯定是不能用EDTA了，Annexin V是依赖钙离子的，EDTA螯合钙离子会影响其结合...

总算涨姿势了！！！谢谢
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为爱而生
5楼2014-05-27 11:29:20
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