24小时热门版块排行榜    

查看: 1299  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

[求助] 基因克隆 已有4人参与

我需要克隆一个片段,大小是240bp左右,我要克隆这个基因的cds区去构建载体做过表达,请问设计引物的时候是不是要从起始密码子也就是5端的碱基处,然后从3端末尾处也得有引物系列,也就是说这个引物是不是要扩增大小是基因原长也就是240bp?谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwlygy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

亲有问题再问我哦,我会这个!!!

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-05-24 13:07:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

wwlygy

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-05-24 12:42:50
至少要把CDS区包含,也可以大一点!但不宜大太多,几十bp以内吧!这么小估计一次PCR就完活了!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-05-24 12:08:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-24 20:42:33
我一般也就是在起始密码子处和终止密码子处设计引物的。设计引物的时候还要考虑加kozak序列和读框的问题(跟你的载体有关)
4楼2014-05-24 13:13:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wwlygy at 2014-05-24 13:07:02
亲有问题再问我哦,我会这个!!!

不过我找到的序列正好从起始密码子atg开始的,然后最后一个碱基也是外显子,所以要克隆这个基因必须要在起始和结尾设计引物?
5楼2014-05-24 13:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪!?!
[考研] 07化学303求调剂 +3 睿08 2026-03-25 3/150 2026-03-25 16:02 by allen-yin
[考研] 289求调剂 +11 硕星赴 2026-03-23 11/550 2026-03-25 15:33 by fch1983
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 考研调剂 +4 呼呼?~+123456 2026-03-24 4/200 2026-03-24 23:16 by barlinike
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 招08考数学 +7 laoshidan 2026-03-20 16/800 2026-03-24 17:52 by 乌拉儿山脉
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +11 枫桥ZL 2026-03-18 13/650 2026-03-22 20:26 by edmund7
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见