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xiao-h-h

金虫 (小有名气)

[求助] 麻黄碱和伪麻黄碱在体外的保留时间比加入到空白血浆中的长。已有1人参与

如题,做麻黄碱和伪麻黄碱的药动,麻黄碱和伪麻黄碱混合标准品的保留时间是17和19分钟,而加入到空白血浆中后,经已经沉淀蛋白处理,75%甲醇复溶后进样,保留时间则在13和15分钟,比体外混合标准品提前了4分钟左右。用的柱子是安杰拉的C18柱,流动相用的是醋酸铵-醋酸-水和甲醇系统,走的梯度。不知是什么原因导致了保留时间的提前,并且发现随着时间的推移,后面进样的保留时间比前面的保留时间短。求液相高手解救。
麻黄碱和伪麻黄碱在体外的保留时间比加入到空白血浆中的长。
质控样品和空白血浆.png


麻黄碱和伪麻黄碱在体外的保留时间比加入到空白血浆中的长。-1
麻黄碱和伪麻黄碱混合标准品.png
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 轩辕义 at 2014-05-24 09:41:16
你是第一次发现这个问题?如果做了大量实验,尔这个现象称为规律的话,可能是麻黄碱的存在形式发生了变化(个人观点,既然保留时间发生这么大的变化,可能是麻黄碱某部分结构变化,导致和c18填料作用减弱)有理由相 ...

刚看了一个帖子,说http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7450224&fpage=1。可能跟你的两次进样溶剂不一样有关系(才疏学浅,不要介意。
3楼2014-05-24 09:43:50
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轩辕义

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是第一次发现这个问题?如果做了大量实验,尔这个现象称为规律的话,可能是麻黄碱的存在形式发生了变化(个人观点,既然保留时间发生这么大的变化,可能是麻黄碱某部分结构变化,导致和c18填料作用减弱)有理由相信是血浆(缓冲液)改变了麻黄碱的存在形式,导致保留时间变小。另外,我觉得你的色谱峰不对称啊,有些拖尾的现象,可以清洗一下哦

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-05-24 09:41:16
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xiao-h-h

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 轩辕义 at 2014-05-24 09:41:16
你是第一次发现这个问题?如果做了大量实验,尔这个现象称为规律的话,可能是麻黄碱的存在形式发生了变化(个人观点,既然保留时间发生这么大的变化,可能是麻黄碱某部分结构变化,导致和c18填料作用减弱)有理由相 ...

刚做分析实验,不算是做了大量实验,这个现象重复出现5-7次吧,加进血浆再处理的保留时间普遍比混合标准品的提前,之前用的磷酸-乙腈洗系统也是这样。峰形是有些拖尾,清洗下会好些?抑制拖尾不是要加点酸的嘛。要是与血浆结合的话会发生什么样的反应呢?或是怎么才能查到发生什么反应?
4楼2014-05-24 15:58:57
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xiao-h-h

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 轩辕义 at 2014-05-24 09:43:50
刚看了一个帖子,说http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7450224&fpage=1。可能跟你的两次进样溶剂不一样有关系(才疏学浅,不要介意。...

两次进样的溶剂都是75%甲醇
5楼2014-05-24 16:00:39
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