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qqwei专家顾问 (知名作家)
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cell migration 已有4人参与
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大家好！本人新手入门cell migration的学习研究，但是目前没有方向性，不知如何研究。尤其是应该采用什么手段方法观察细胞是否迁移？如果直接染色后观察，视野那么大，如何确定哪个细胞动了哪个细胞没动呢？ 希望大家多多指教！ |
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2楼2014-05-21 23:53:09
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3楼2014-05-22 06:24:19
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4楼2014-05-24 17:53:35
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如果做gel的单细胞迁移，前提是gel不能太厚（否则影响显微镜聚焦），可以用time lapse。我们之前活细胞染色是用GFP腺病毒转染的，你也可以用plasmidDNA（EGFP）+PEI转染，就是效率低些，大概50%左右。荧光显微镜必须配套活细胞工作站以保证湿度和CO2的浓度，以及定时拍照的软件（一般leica和zeiss都自带）。得到的多张细胞图片后，使用ImageProPlus（IPP）软件进行分析，可以在网上搜到教程。最后可以得到单细胞和多细胞的迁移轨迹、速率、方向性等数据。 如果细胞量够大，可以做Transwell小室的细胞侵润模型，可以利用血清浓度梯度诱导，非常成熟的方法，直接可以搜到。 |
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qqwei8楼2014-06-09 03:43:46
9楼2014-06-09 03:44:54
qqwei
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