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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急求各位大神的帮助啊，小妹拜上！！！
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SIQING2013

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求各位大神的帮助啊，小妹拜上！！！已有1人参与

1、提的线虫DNA，先液氮研磨，然后按照试剂盒步骤提的（东盛基因组提取试剂盒），问题，含量低，OD260/OD280大于2，A230偏高，总是有降解，提的DNA图片已经上传了。
2、液氮研磨后用称量小勺将粉末转移至1.5ML离心管的过程中基本都变成了液态，会不会有影响

急求各位大神的帮助啊，小妹拜上！！！
DNA.jpg
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1楼2014-05-21 11:10:31
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gyesang

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
SIQING2013(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-21 12:19:43
你这个标题不是很好
用kit提基因组DNA，量就是提不高，你可以试试用酚氯仿抽提的那种方法
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-05-21 11:54:21
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SIQING2013

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-21 11:54:21
你这个标题不是很好
用kit提基因组DNA，量就是提不高，你可以试试用酚氯仿抽提的那种方法

嗯，谢谢建议，不过我的后续试验不适合用酚氯仿抽提，不知道关于DNA降解的问题有木有什么经验
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3楼2014-05-21 14:49:40
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gyesang

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引用回帖:
3楼: Originally posted by SIQING2013 at 2014-05-21 14:49:40
嗯，谢谢建议，不过我的后续试验不适合用酚氯仿抽提，不知道关于DNA降解的问题有木有什么经验...

不知道你后续要做什么样的实验，可否详细说下

酚氯仿抽提的DNA不影响后续的酶切反应
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4楼2014-05-21 17:30:04
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SIQING2013

新虫 (初入文坛)
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4楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-21 17:30:04
不知道你后续要做什么样的实验，可否详细说下

酚氯仿抽提的DNA不影响后续的酶切反应...

我后面要用荧光定量的方法对DNA定量，然后做PCR，测DNA损伤率，文献都说不建议用酚氯仿抽提，因为酚氯仿抽提可能会破坏DNA的完整性
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5楼2014-05-22 09:53:43
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