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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 为什么marker会出现大分子部分丢失
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huang.m.yang

新虫 (初入文坛)

[交流] 为什么marker会出现大分子部分丢失 已有1人参与

本人做WB有两个月了，一直有个现象无法解释，marker的大分子部分一直不全，经常丢失找不到条带，但是同样实验室的其他人做就没有出现这样的情况，marker一直好好的存在，有没有人知道原因是什么？
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kaobo2012

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1楼 2014-05-19 13:21:12
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
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其他人用的试剂跟你一样吗？大分子MARKER丢失我没有归到过，小分子的到是遇到过。原因是分离胶浓度太小，分辨率达不到，Marker没有分开。希望对你有帮助。
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2楼2014-05-19 15:38:36
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huang.m.yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-19 15:38:36
其他人用的试剂跟你一样吗？大分子MARKER丢失我没有归到过，小分子的到是遇到过。原因是分离胶浓度太小，分辨率达不到，Marker没有分开。希望对你有帮助。

用的试剂都一样，但是我的marker越跑越淡，最开始很明显到后来就木有了
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3楼2014-05-19 16:03:43
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kaobo2012

木虫 (正式写手)
★
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哦，我一般SDS-PAGE的Marker的用量是4-5ul，Western Blot用量是2-3ul.一般都很清晰。偶尔也有看不到Marker的情况，但是目标条带还是有的。你的目标条带有吗？
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4楼2014-05-20 20:03:54
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huang.m.yang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-20 20:03:54
哦，我一般SDS-PAGE的Marker的用量是4-5ul，Western Blot用量是2-3ul.一般都很清晰。偶尔也有看不到Marker的情况，但是目标条带还是有的。你的目标条带有吗？

有 曝光后也很清晰
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5楼2014-05-21 11:33:28
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