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wwkuaile

新虫 (小有名气)

[求助] Western结果怎么样啊?内参做的怎么样?边缘效应怎么解决啊? 已有4人参与

这是最近做的一批样,大家帮忙看看做的怎么样?内参可以吗?貌似那什么还不是太满意,最后那个道的边缘效应怎么解决啊??每次跑都是这个样子??

Western结果怎么样啊?内参做的怎么样?边缘效应怎么解决啊?
内参.gif
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

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楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子,需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实,我感觉这样的图上,已经是很好的了。背景有些深,可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。

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2楼2014-05-19 15:49:48
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普通回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

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楼主谦虚了,你这图片发表是没有问题的。
3楼2014-05-19 17:31:31
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weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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内参很齐的,只不过最后一道是配胶的边缘,容易上扬
4楼2014-05-19 20:02:50
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CasGene

铜虫 (初入文坛)

可以,没问题,应该挺不错了。
5楼2014-05-19 21:03:04
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knightdream

金虫 (初入文坛)

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一般最边上两个道是不用的,只加loading buffer。如果必须要用,要跑得很慢很慢很慢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-05-19 21:31:52
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wwkuaile

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-19 15:49:48
楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子,需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实,我感觉这样的图上,已经是很好的了。背景有些深,可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。

我扫膜的时候拖了那个对比度好像,那如果我用时间短一点曝,要达到这种程度是不是背景也是一样的黑?用的是5%的牛奶啊,难道因为泡泡的原因我配浓度低了吗?我们实验室是封闭一个小时的。
7楼2014-05-23 23:20:00
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wwkuaile

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-19 17:31:31
楼主谦虚了,你这图片发表是没有问题的。

真的假的,为什么老师看了还是不太满意哟,说还得练。还有就是这个定量不是我定的,我每次BCA定量好像做的不是太好,做了标曲之后R平方可以达到0.99几,可是跑出来actin还是不太齐。
8楼2014-05-23 23:22:02
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wwkuaile

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-19 15:49:48
楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子,需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实,我感觉这样的图上,已经是很好的了。背景有些深,可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。

老师让我先拿十孔的练的,说我这最后一条泳道不是所谓的边缘效应引起的,不该是这个样子,我不晓得了
9楼2014-05-23 23:23:25
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wwkuaile

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by knightdream at 2014-05-19 21:31:52
一般最边上两个道是不用的,只加loading buffer。如果必须要用,要跑得很慢很慢很慢

我用的是80V,不变电压的。这个已经很慢了吧
10楼2014-05-23 23:24:04
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