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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » Western结果怎么样啊？内参做的怎么样？边缘效应怎么解决啊？
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wwkuaile

新虫 (小有名气)

[求助] Western结果怎么样啊？内参做的怎么样？边缘效应怎么解决啊？ 已有4人参与

这是最近做的一批样，大家帮忙看看做的怎么样？内参可以吗？貌似那什么还不是太满意，最后那个道的边缘效应怎么解决啊？？每次跑都是这个样子？？

Western结果怎么样啊？内参做的怎么样？边缘效应怎么解决啊？
内参.gif
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1楼 2014-05-19 11:22:13
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子，需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实，我感觉这样的图上，已经是很好的了。背景有些深，可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。
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wwkuaile
2楼2014-05-19 15:49:48
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普通回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主谦虚了，你这图片发表是没有问题的。
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3楼2014-05-19 17:31:31
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weskerZXC

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
内参很齐的，只不过最后一道是配胶的边缘，容易上扬
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4楼2014-05-19 20:02:50
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CasGene

铜虫 (初入文坛)
可以，没问题，应该挺不错了。
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5楼2014-05-19 21:03:04
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knightdream

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般最边上两个道是不用的，只加loading buffer。如果必须要用，要跑得很慢很慢很慢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-05-19 21:31:52
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wwkuaile

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-19 15:49:48
楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子，需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实，我感觉这样的图上，已经是很好的了。背景有些深，可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。

我扫膜的时候拖了那个对比度好像，那如果我用时间短一点曝，要达到这种程度是不是背景也是一样的黑？用的是5%的牛奶啊，难道因为泡泡的原因我配浓度低了吗？我们实验室是封闭一个小时的。
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7楼2014-05-23 23:20:00
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wwkuaile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by BioChen at 2014-05-19 17:31:31
楼主谦虚了，你这图片发表是没有问题的。

真的假的，为什么老师看了还是不太满意哟，说还得练。还有就是这个定量不是我定的，我每次BCA定量好像做的不是太好，做了标曲之后R平方可以达到0.99几，可是跑出来actin还是不太齐。
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8楼2014-05-23 23:22:02
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wwkuaile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-05-19 15:49:48
楼主用的胶应该是十齿的。你可以用十五齿的梳子，需要的样品不上在边上。边上可以用1XLB。
其实，我感觉这样的图上，已经是很好的了。背景有些深，可能是封闭时间不够或封闭液浓度低。

老师让我先拿十孔的练的，说我这最后一条泳道不是所谓的边缘效应引起的，不该是这个样子，我不晓得了
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9楼2014-05-23 23:23:25
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wwkuaile

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by knightdream at 2014-05-19 21:31:52
一般最边上两个道是不用的，只加loading buffer。如果必须要用，要跑得很慢很慢很慢

我用的是80V，不变电压的。这个已经很慢了吧
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10楼2014-05-23 23:24:04
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