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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 肠道内微生物DNA提取后，PCR却无结果
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lilili25

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xiangchou812 at 2014-05-21 20:36:19
模板稀释10倍试试看

我已经做了梯度PCR
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11楼2014-05-22 07:43:24
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xiangchou812

木虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by lilili25 at 2014-05-22 07:43:24
我已经做了梯度PCR...

一般我们讲的梯度PCR专指温度梯度吧？
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12楼2014-05-22 09:04:20
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启动子2013

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

27f和1492r通用引物PCR产物在1.5kb左右，所以你的PCR extension time要1.5分钟以上（用Taq酶的话），一般我们用2分钟。我刚做这个的时候就犯了这样的错误。
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通往表达的启动子。
13楼2014-06-02 15:55:44
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者
O(∩_∩)O加油~。
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曾经有人问我为什么要学微生物，我只是想离生命的本质更近一点。
14楼2014-06-07 14:21:39
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lilili25

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by j2 at 2014-05-21 09:03:46
如果短片段出来了，考虑一下pcr体系的问题

我用的gc338f和518r的引物P小片段，也没有！我在用试剂盒提DNA时把肠道组织也放进去了。这有没有可能是把肠道组织的DNA提取出来。
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15楼2014-08-19 16:31:45
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zhongzhen

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by lilili25 at 2014-08-19 16:31:45
我用的gc338f和518r的引物P小片段，也没有！我在用试剂盒提DNA时把肠道组织也放进去了。这有没有可能是把肠道组织的DNA提取出来。...

应该不会。楼主，你这个问题解决了没有？我也有这样的问题，我做了阳性对照，排除了PCR体系的问题，但是模板也不知道有什么问题，都是照说明书提的DNA啊。你用的是什么试剂盒啊？
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16楼2014-12-24 20:54:08
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wadecao

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
17楼2015-01-04 13:46:49
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lifehuangwei

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是你的基因大部分是宿主的基因~所以很难p
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18楼2015-10-28 16:48:19
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ycy920430tc

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问是用什么试剂盒提的基因组？
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19楼2017-04-24 15:26:09
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z457634588

木虫 (小有名气)
虽然已经是14年的帖子了，但还是想问问楼主当时是怎么解决问题的，我现在就是这个情况，基因组浓度太低，PCR产物条带很弱，没有办法测序。
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20楼2017-04-24 17:14:17
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