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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

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专业: 环境微生物学

[求助] 关于半定量PCR的内参调节问题已有5人参与

最近在做半定量PCR，确定了内参基因的循环数，但是内参基因额亮度一直不好调整，需要调整模板CDNA的浓度，但是工作量太大了，我想问一下有没有哪位大侠知道如何快速调整CDNA的模板量，从而使得内参基因在选定的扩增循环数内亮度相同呢？不胜感激。@西瓜@biostar2009

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生命不息奋斗不止

1楼 2014-05-18 17:27:22

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Neo2000

木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
冷雁孤旅: 金币+1, ★有帮助 2014-05-20 16:15:39

引用回帖:

4楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2014-05-18 23:27:18
最开始提取的RNA，我测了RNA的浓度，浓度参差不齐，不好调整，我就直接都取了7ulRNA反转，现在半定量的内参亮度也不同，现在可i以测定反转录的CDNA的浓度来补救么？我想要是CDNA的浓度相同的话，那么内参的扩增亮 ...

测cDNA浓度是无法做到的，建议做qPCR

[ 发自小木虫客户端 ]