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三国恋

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[求助] 核酸检测方面有哪些牛人，想考博不知道报考谁的已有2人参与

做的核酸检测方面的，但是对哪些人做的很好不是很了解，只知道谭蔚泓等人，还有其他的哪些牛人吗，求助

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1楼 2014-05-16 16:52:06

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pennchem

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【答案】应助回帖

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三国恋(西门吹雪170代发): 金币+7, 鼓励热心回帖交流 2014-05-18 19:51:22

我自己写了一个核酸检测方面的review，希望对你有用，（100%原创，转载请注明，谢谢！）

作为现代生物技术的基础的PCR技术，出现在1983年。PCR过程中的解链、退火、以及延伸的循环操作以及成为核酸扩增步骤的标准过程，同时PCR也成为了核酸扩增的同义词。然而，这一技术是利用耐热性核酸聚合酶在人为设定温度循环下实现的，在自然界生物体内核酸并不是这样延伸或者扩增的。人们所熟悉的生物大都是在条件非常温和的条件下（而且是在恒温下）实现其核酸延伸或扩增的。柯晶生物的核心技术就是实现在体外的试管中（in vitro），实现在生物体内（in vivo）的高效的核酸扩增过程。
在PCR技术问世后的30多年中，衍生出许多灵敏度更高，或者操作更简便，或者定量的方法。这些方法以及广泛应用于科研，医院，疾控，以及农林牧渔等等。然而在大规模简化操作过程，或者提供定量化的研发及其商业化过程中，使用者对仪器，试剂，耗材，甚至技术支持的依赖却与日俱增，反而限制了该技术在更广泛领域的应用。
在核酸扩增技术发展过程中，很多人努力改进在温度来简化核酸扩增步骤。经典的PCR是三温度循环（解链，退火，和延伸），在其它改进型的PCR技术都是两温度循环（退火和延伸合并为一步）。在恒温扩增（isothermal amplification）方面，出现了如等温核酸扩增，RNA扩增等技术，以Bst核酸聚合酶延伸的恒温扩增的技术路线大多是利用两对或者更多的引物，在60度左右实现单一温度的扩增。该技术在起始的引物退火时，需要一个90度以上的步骤来实现引物和模板的配对。以RNA逆转录酶来检测核酸的技术，最佳反应温度在42度左右，该技术用以检测RNA，不需要解开双链来配对，不存在解链的问题，也避免了产物检测后续的污染问题。
在温度循环方面的努力，也有很多人放在高通量上面，也就是多重PCR，这方面技术也衍生出不同的各种技术。
在扩增方面，有人不停的优化反应体系，筛选效率更高的聚合酶，这些都极大的提高了核酸扩增的效率，从而提高了检测灵敏度。
除了核酸扩增之外，一部分致力于扩增前的核酸提取，比如spin-column提取，自动提取等等，模板质量的提高能提高扩增的效率，从而提高检测灵敏度。
也很多人致力于核酸扩增后的检测，最初都是通过琼脂糖或者聚丙烯酰胺电泳检测，到毛细管电泳检测，然后发展到荧光检测，再发展试纸条检测。电泳检测的问题是污染严重操作麻烦。荧光检测的好处是扩增和检测同时进行，而且可以进行定量。试纸条检测方便快捷。
当然每个步骤的优化结果都可以组合起来，形成新的技术或产品。

好了，今天就写到这里吧，有机会我在展开