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wzysllm

木虫 (小有名气)

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[求助] CHO表达IgG全长抗体已有2人参与

使用CHO表达IgG全长抗体时候，分别PCR扩增了轻链(可变区+恒定区)和重链(可变区+恒定区)，拟分别插入带两个启动子的表达载体中，再稳转CHO细胞。

想了解一下，IgG中轻链和重链间起连接作用的二硫键需要加么，加到轻链或者重链的哪一端比较好呢，谢谢！

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1楼 2014-05-15 16:35:45

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antibodyknow

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wzysllm: 金币+10, ★★★很有帮助, 非常感谢你的建议。 2014-05-16 08:31:46

如果你克隆的是完整的抗体轻链和重链基因，那么你就不用担心二硫键的形成问题，因为抗体重轻链间的二硫键形成所需的cys已经在抗体恒定区序列中了。在哺乳动物细胞中表达的重轻链会自组装形成链间二硫键和链内二硫键。
但全抗体表达可不是你说的那么简单。如果实验室没有抗体研究的基础，我建议你找一个比较专业的技术服务公司帮你做全抗体表达和纯化。
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