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关于黑曲霉孢子悬液的制备及稀释问题求助 已有1人参与
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本人现在做黑曲霉的孢子悬液制备及梯度稀释，具体流程如下： 1，将培养5-7天的黑曲霉斜面培养基用5ml生理盐水洗下，放入事先灭好菌的带玻璃珠的三角瓶中，打散40min. 2,三层擦镜纸过滤，取孢子，离心，6000rpm,10min,再用生理盐水洗两遍，最后生理盐水重悬，得孢子悬液。 关于计数问题：这个非常头疼。 1.将制备好的孢子悬液稀释100倍，过程是先取500ul,加入450ul生理盐水中稀释10倍，依次类推，稀释100倍血球计数板计数，结果是约1.2X10^8个/ml。按理论上，稀释到10^-7倍，每100微升应该是110个，但是我稀释到这个梯度以后在显微镜下计数时看不到孢子了。如何确定涂板时，每100ul的孢子数？ 还有一个问题是咨询师姐说每100倍进行稀释，就是取1ml菌夜加入100ml生理盐水中进行稀释。 希望大家给点建议…… |
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