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Exonuclease Ⅲ 可以用来切RNA 得到guanosine 5'-monophosphate吗
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| 老板要我买一个可以用来切RNA得到有鲜味的guanosine 5'-monophosphate的核酸外切酶,我是学纯化学的孩子好么...生物的东西真心不记得了,求各位前辈指教:我现在找到一个Exonuclease Ⅲ (E. coli ),他们网站上的介绍是3'到5'的顺序,但是我不太明白这个顺序切出来是5'的核苷酸吗 (必须要留下5'的才可以,切反了我就完蛋了,花上千块买了没用的药品肯定被骂死...当然老板自己好像也不是很确定,我问他的时候他就叫我查文献make sure,我也没找到文献嘤嘤...) |
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-05-15 21:29:48
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-05-15 21:29:48
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对我们这些只会做点小实验的人，这简直就是另外一个世界。 我今天专门去中国知网看了一下呈味核苷酸生产的文章，酶法制备呈味核苷酸是主流工艺，大多数都是用的桔青霉PDE，但是也有人报道这个酶活性不够，改用RNaseP1的，但是显然后者成本更高。我一直好奇IMP是怎么得到的，原来有酶可以把AMP脱氨转成IMP，于是就没有纯化步骤了，就这样，干燥了就拿去当产品可以卖了。。。 我觉得有一点可能需要考虑的是，我看有些文章也讨论了，就是这样搞的一个前提是，RNA必须是完整的，因为就像现在选酶切成NMP很困难一样，RNA更容易水解的方式产生的是5'羟基，3'磷酸的结构。也就是说，如果你用来纯化的菌要死不活了，RNA已经开始降解了，这些降解产物都是跟NMP相反的结构的。 另外，我看有文章里说，这些企业连桔青霉都是自己养的。 希望你能够改进工艺，这样才能赚钱吧。。。 |
14楼2014-05-15 21:12:57
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2楼2014-05-12 22:04:15
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3楼2014-05-12 22:09:46
4楼2014-05-13 17:06:10