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20094020111

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助大神,运输机制研究中如何选择实验方法 已有1人参与

最近在思考老板给的思路,利用饲喂荧光蛋白的方法分析某植物运输的细胞机制,用石蜡切片,荧光电镜观察。我思考的时候发现几个问题:1.用什么样的荧光蛋白可以达到这样的目的?我查了好多资料,觉得植物很难吸收荧光蛋白。2.植物石蜡切片能用荧光电镜观察吗?就算荧光蛋白进去了,荧光电镜能观察么?我才疏学浅,为了这几个问题费了不少时间,希望各位大神能够帮帮我。
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starseacow

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
20094020111: 金币+64, ★★★很有帮助, 首先谢谢,思路很好,对我很有启发,我还有问题请教,但我现在忙,等我忙完了把金币给你。 2014-05-14 13:04:50
荧光蛋白的使用是将携带荧光蛋白基因的载体通过发根农杆菌转入植物中让其表达。再进行观察的。
1 荧光蛋白可以连接到一些特定蛋白上,观察它们的运输
2 也可以直接使用可溶并且可以分泌到胞外的荧光蛋白,同时过表达或敲出其他要研究的蛋白,观察对正常分泌的影响。
3 某些荧光染料可以直接用来观察细胞转运

你可以看看我们组去年的文章,用到第二个方案
Karnik et al.  Plant Cell, 25 (4). pp. 1368-1382.
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-05-13 04:23:30
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