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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 铜绿假单胞菌转接问题
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fzhrobin

木虫 (正式写手)

[求助] 铜绿假单胞菌转接问题 已有5人参与

亲们：
我分离的铜绿假单胞菌纯化后就一直保存在2-8度冰箱，由于每次用都是之前刚活化过的，由于对铜绿假单胞菌的保存不是特别清楚，结果上上周把近期活化用过的都清理了。上周五有拿出保存在冰箱中的几个月前的斜面（离现在日期最近的是三月份的）重新活化，结果过了个周末，今天（周一）来一看，一个都没有活化成功。有点傻眼了。赶紧查了一下，这次知道铜绿假单胞菌是不可以这样保存的。汗啊……

现在的问题是，这个菌还有什么办法能活化成功吗？本打算这周活化下就要进行后面的大批量实验了，现在出现这种情况，我该怎么办？

有没有什么补救的措施？积极急急急急急急……

请高手指点。

非常感谢！
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1楼 2014-05-12 09:20:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

王丹2013

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fzhrobin: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-15 09:09:26
这种情况下建议你直接用液体LB培养基把斜面上的菌的都洗出来，接种到液体培养基里摇，活的机会大一些，然后再划线。另外液体菌种可加入等体积50%的甘油，混匀后-80℃长期保藏。
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9楼2014-05-12 19:57:25
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2014-05-12 10:03:39
你试试先从斜面接到平板培养几（多接点），不长的话再从平板上挑点接到另一平板上，估计就活了，屡试不爽，祝好运
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但行好事，莫问前程
2楼2014-05-12 09:39:32
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fzhrobin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 20093651 at 2014-05-12 09:39:32
你试试先从斜面接到平板培养几（多接点），不长的话再从平板上挑点接到另一平板上，估计就活了，屡试不爽，祝好运

从斜面接到平板培养几（多接点），是不是划线培养就可以？
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3楼2014-05-12 09:45:37
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你爷的

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
fzhrobin: 金币+2, ★有帮助 2014-09-30 12:01:33
铜绿假单胞菌我们摸索出来保存在室温下一般可以保存2年，我们实验室都是保存在室温下
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14楼2014-09-28 21:21:26
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普通回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fzhrobin at 2014-05-12 09:45:37
从斜面接到平板培养几（多接点），是不是划线培养就可以？...

嗯，划线，多转几次就好了
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fzhrobin
但行好事，莫问前程
4楼2014-05-12 10:00:30
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fzhrobin

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 20093651 at 2014-05-12 10:00:30
嗯，划线，多转几次就好了...

还有个疑问，从斜面接到平板培养基跟从斜面接到斜面有什么区别？难道就是因为平板可以挑去单菌落？还是有其他原因？

还有，我从斜面接种到斜面也可以吧？呵呵
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5楼2014-05-12 10:02:58
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by fzhrobin at 2014-05-12 10:02:58
还有个疑问，从斜面接到平板培养基跟从斜面接到斜面有什么区别？难道就是因为平板可以挑去单菌落？还是有其他原因？

还有，我从斜面接种到斜面也可以吧？呵呵...

具体什么区别我不懂哈，但是这样效果真的不错，当然，斜面到斜面也是可以的，新鲜的培养基嘛
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但行好事，莫问前程
6楼2014-05-12 11:52:36
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fzhrobin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 20093651 at 2014-05-12 11:52:36
具体什么区别我不懂哈，但是这样效果真的不错，当然，斜面到斜面也是可以的，新鲜的培养基嘛...

我已经转接了，期待着能看到活的，呵呵

还有个问题，前面你说接到平板“不长的话”从平板上挑点接到另一平板上，请问“不长的话”如何接到另一平板上？纳闷呢
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7楼2014-05-12 14:51:11
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
fzhrobin(dllchina代发): 金币+3, 谢谢热心应助 2014-05-13 10:40:25
引用回帖:
7楼: Originally posted by fzhrobin at 2014-05-12 14:51:11
我已经转接了，期待着能看到活的，呵呵

还有个问题，前面你说接到平板“不长的话”从平板上挑点接到另一平板上，请问“不长的话”如何接到另一平板上？纳闷呢...

。。。。不是让你多接点菌体在平板嘛，虽然不长，但是菌体还是能看见啊，就转接那个
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但行好事，莫问前程
8楼2014-05-12 15:52:31
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fzhrobin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 王丹2013 at 2014-05-12 19:57:25
这种情况下建议你直接用液体LB培养基把斜面上的菌的都洗出来，接种到液体培养基里摇，活的机会大一些，然后再划线。另外液体菌种可加入等体积50%的甘油，混匀后-80℃长期保藏。

谢谢！
你说的这种方法我也准备试试看。
昨天我直接接种到平板上，一共接种了9个平板，把我之前保藏的斜面和固体平板上的都拿来划线接种到了9个平板上，今早晨去看了下只有一个平板上有菌长出，而且现在很小，还不能确定是我要的菌还是污染的杂菌。其他的打算在培养两天看看。

由于之前没有想到会出现这种情况，对菌种的保藏没太在意，导致现在保藏在斜面上的只有一个斜面，打算都刮下来转接到营养肉汤培养基中（之前一直用的营养肉汤培养基），摇一天再划线分离。对了，涂布应该也可以吧？
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10楼2014-05-13 08:53:05
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