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圣林2

银虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 68.3
红花: 1
帖子: 39
在线: 139.2小时
虫号: 2552901
注册: 2013-07-18
专业: 病毒学

[求助] 纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性，为什么出不来溶解圈呢？已有1人参与

真心求教大神：
      用纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性，蚓激酶做标准曲线，但是一直出不来溶解圈，不知什么原因。
因为本人是初次做这方面的实验，缺乏经验，配方是按照论文查找的：
      1.牛纤维蛋白原溶解于pH7.4磷酸盐缓冲液，制成0.89mg/ml溶液；牛凝血酶溶解于pH7.4磷酸盐缓
冲液中，制成7.5单位/ml的溶液；
      2.取1%琼脂糖20ml,水浴50°C15min以上，然后将牛纤维蛋白15ml在50℃水浴中恒温15min，两者温度一致时将凝血酶
1ml和牛纤维蛋白原15ml与琼脂糖溶液迅速混合倒平板。
      所用点样的蚓激酶溶液浓度梯度位于400-2000单位/ml，应当指出的是我在前面的实验中曾经用同样的方法做出过结果，
后来就一直没有溶解圈出现了，一开始怀疑是药品变质了，更换之后还是没有，百思不得其解，这是本人的本科毕业设计，
时间不多了，较为着急，望有经验大神指点迷津！！

   因本人刚注册不久，金币缺乏，故给的较少，不过是真心求助，谢谢！

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