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纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性,为什么出不来溶解圈呢?已有1人参与
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真心求教大神: 用纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性,蚓激酶做标准曲线,但是一直出不来溶解圈,不知什么原因。 因为本人是初次做这方面的实验,缺乏经验,配方是按照论文查找的: 1.牛纤维蛋白原溶解于pH7.4磷酸盐缓冲液,制成0.89mg/ml溶液;牛凝血酶溶解于pH7.4磷酸盐缓 冲液中,制成7.5单位/ml的溶液; 2.取1%琼脂糖20ml,水浴50°C15min以上,然后将牛纤维蛋白15ml在50℃水浴中恒温15min,两者温度一致时将凝血酶 1ml和牛纤维蛋白原15ml与琼脂糖溶液迅速混合倒平板。 所用点样的蚓激酶溶液浓度梯度位于400-2000单位/ml,应当指出的是我在前面的实验中曾经用同样的方法做出过结果, 后来就一直没有溶解圈出现了,一开始怀疑是药品变质了,更换之后还是没有,百思不得其解,这是本人的本科毕业设计, 时间不多了,较为着急,望有经验大神指点迷津!! 因本人刚注册不久,金币缺乏,故给的较少,不过是真心求助,谢谢! |
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