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海风li

木虫 (正式写手)

[求助] 天然产物分离,爬大板问题

有一个样品用HPLC分离纯化后爬板,后面还是有一点黄色的东西,然后小板摸好条件爬大板,冲下来浓缩点板还是和原来一样不纯,这是为什么?我爬了两次大板,都没除去后面这个黄色的东西,是所分样品有点拖的原因还是?是不是样品不稳定?是上样量大?小板的时候是分开的,大板也看着分开了,但是刮下来点板还是那样!求助大神啊!

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uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
海风li: 金币+10, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2014-05-09 20:25:28
还有,你既然都用HPLC分离纯化了跑板,还有杂质,说明HPLC条件没摸好,应该先把HPLC的条件再优化吧。如果HPLC已经是单峰了,结果还是跑出了杂质,说明HPLC的检测器条件不合适,如波长,此时可以用DAD检测器看看波长是否合适,说不定有未响应的物质
4楼2014-05-09 11:55:22
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普通回帖

海风li

木虫 (正式写手)

大神们现在还没睡吧
2楼2014-05-06 22:47:50
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uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
海风li: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-05-09 20:36:53
可能是上样量大的原因。应该不是样品不稳定,若是样品不稳定,小板上也应该不纯。
3楼2014-05-09 11:51:12
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海风li

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by uranuser at 2014-05-09 11:55:22
还有,你既然都用HPLC分离纯化了跑板,还有杂质,说明HPLC条件没摸好,应该先把HPLC的条件再优化吧。如果HPLC已经是单峰了,结果还是跑出了杂质,说明HPLC的检测器条件不合适,如波长,此时可以用DAD检测器看看波长 ...

HPLC条件之前都摸了,是送去做核磁说不纯,液相梯度降低也还是一个峰,点板在紫外下看黄色是看不见的,香草醛浓硫酸显色后才会在目标点后面出现黄色。而且刮板时分开了啊,因为板放久了之后显出来了,但是再点小板,还是有。。。。
5楼2014-05-09 20:24:13
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