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Hoechst33258 DNA染色数据平行性很差无法制定标准曲线，请教各位大神是哪里出问题了吗
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 使用Hoechst33258检测样本溶液中的GFP含量，检测仪器是荧光酶标仪。结果每次数据差异都很大：如果用一个样本做几个复孔同时检测，标准误大到离谱。而且每次做出的标准曲线也相差很远。不知道有没有哪位大神有经验的？使用hoechst33258直接检测DNA的操作过程中有什么需要特别注意的吗？我的操作是：使用的Hoechst33258为sigma公司的，双蒸水稀释至4ug/ml。取样本200ul于96孔黑板，加Hoechst33258 10ul。室温避光孵育10min用荧光酶标仪检测。波长365/410-460.每次检测时都会做一遍标准曲线，就是把已知的DNA配成10~1000ng/ml的阶梯浓度一起检测。 反复做了几个星期了，次次数据都各种匪夷所思千差万别，求点拨~~ |
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