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哪个引物更合适？急急
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我准备克隆一段大约2.5kb左右的基因片段，下面是两对引物： 第一对是我自己设计的，第二对是老板给改的 请各位虫友给点意见吧 总感觉老板的Tm值相差太多，而且其3‘端还是密码子末端 Primer1 CCGGAATTC agta aagaaagt caaatggtg g EcoRI Tm=60.9 GC%= 36.3% Primer2 CCGCTCGAGTCAATGGG TGCACACGGC XhoI Tm=65.8 GC%=64.7% Primer1 CCGGAATTC agt aaa gaa agt caa atg gtg EcoRI Tm=56.4 GC%= 33.3% Primer2 CCGCTCGAGTCAATGGG TGCACACGGCTTTTG XhoI Tm=75.2 GC%=54.5% |
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lauren180
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