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xxlixin新虫 (小有名气)
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[求助]
药理实验一些不懂的问题想请教一下已有3人参与
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我要做的是一个药物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用，现在还没开始做。 文献上说的是大鼠眼球采血，分离血清，检测GPT活性，TG含量，然后处死小鼠，立即称取0.2g新鲜肝脏放入置有冰冷的匀浆介质的玻璃匀浆器中，在冰浴中制成100g/L匀浆，然后离心，取上清液，再测定GSH、MDA的含量。 我现在不清楚的问题是大鼠一般要用什么管装，然后取血量是多少，然后需要怎么处理，需不需要加抗凝剂什么的，最后是拿到医院去测它的参数。还有就是要观察肝组织的SDH活性和糖原含量变化，不清楚是如何观察？ 希望有朋友能尽快帮忙解答一下，O(∩_∩)O谢谢 |
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kobe24song
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15楼2014-04-23 14:35:10
2楼2014-04-22 10:52:50
xxlixin
新虫 (小有名气)
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- 专业: 色谱分析
3楼2014-04-22 12:18:44
【答案】应助回帖
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我们一般用肝素。下面是网上查的抗凝剂，你参考一下： 抗凝是用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。能够阻止血液凝固的物质，称为抗凝剂或抗凝物质。常用抗凝剂和使用方法如下。 1.乙二胺四乙酸（EDTA）盐常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用量为EDTA-K.2H2O1.5～2.2mg/ml血液。不适于凝血检查、血小板功能试验。 2.草酸盐常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。2mg草酸盐可抗凝lml血液。但不适于凝血检查。而且，草酸盐浓度过高还会导致溶血、改变血液pH，干扰血浆钾、钠、氯和某些酶活性的测定。 双草酸盐抗凝剂：适用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查，不适于血小板计数、白细胞分类计数。 3.肝素是加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止医学教.育网搜集整理凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。肝素是红细胞透渗脆性试验的理想抗凝剂。但不适于CBC、细胞形态学检查。每毫升血液肝素用量为（15±2.5）U，多为肝素钠盐或钾盐。 4.枸橼酸盐常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。枸橼酸盐抗凝剂的抗凝力不如上述抗凝剂。枸橼酸钠与血液的抗凝比例为l：9或1：4.适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。 |
4楼2014-04-22 12:48:04