24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4112  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

简单的执着

银虫 (小有名气)

[求助] 大家认为判断引物设计合理的主要依据有哪些 已有3人参与

如题,不知道大家是怎么判断自己设计出来的引物合适不合适的
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

简单的执着

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by j134104 at 2014-04-21 23:38:28
一般可以。但是有时候存在非特异性扩增出现的溶解曲线也是单峰,所以最好同时跑一个凝胶电泳,看是不是单一条带。 还有另一种情况,比如端粒引物这种的容易形成二聚体,并且二聚体可以扩增,也会形成单一溶解曲线同 ...

请问你们在进行实验时是通过哪些条件来判断引物设计是否合理的
5楼2014-04-22 22:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

ottoKING

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
简单的执着(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-22 13:29:06
blast查特异性、退火温度,GC含量,还有就是引物二聚体什么的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2014-04-21 22:49:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

简单的执着

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ottoKING at 2014-04-21 22:49:23
blast查特异性、退火温度,GC含量,还有就是引物二聚体什么的

如果进行RT-PCR后显示扩增曲线挺不错的,溶解曲线是单峰,这能不能说明引物设计合理呀
3楼2014-04-21 23:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j134104

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
简单的执着(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-22 13:29:31
引用回帖:
3楼: Originally posted by 简单的执着 at 2014-04-21 23:16:08
如果进行RT-PCR后显示扩增曲线挺不错的,溶解曲线是单峰,这能不能说明引物设计合理呀...

一般可以。但是有时候存在非特异性扩增出现的溶解曲线也是单峰,所以最好同时跑一个凝胶电泳,看是不是单一条带。 还有另一种情况,比如端粒引物这种的容易形成二聚体,并且二聚体可以扩增,也会形成单一溶解曲线同时扩增曲线很漂亮。这种情况下可以加一个空白对照
4楼2014-04-21 23:38:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-02 13/650 2026-04-04 23:10 by 无际的草原
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 考研调剂 +5 四川王涛 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:18 by 啵啵啵0119
[考研] 085601,一志愿厦大334复试被刷求调剂 +13 曾仰之 2026-04-03 15/750 2026-04-04 20:13 by dongzh2009
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 本科211,293分请求调剂 +6 莲菜就是藕吧 2026-04-03 7/350 2026-04-04 11:12 by 莲菜就是藕吧
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 070300一志愿211,312分求调剂院校 +16 小黄鸭宝 2026-03-30 16/800 2026-04-03 19:53 by lijunpoly
[考研] 五邑大学土木工程招调剂生2026 +3 wyutj 2026-03-31 4/200 2026-04-03 18:21 by zengxj_7201
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-03 16:46 by wxiongid
[考研] 289求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 5/250 2026-04-03 10:09 by 不168
[考研] 材料考研调剂 +10 Gs大王 2026-04-02 10/500 2026-04-03 09:47 by 遗忘消失的灆
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕,331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 358求调剂 +3 王向阳花 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:56 by zzchen2000
[考研] 0703化学321分求调剂 +10 三dd. 2026-03-30 11/550 2026-03-30 19:24 by markhwc
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
信息提示
请填处理意见