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层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊 已有7人参与
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| 我将蛋白水解后应该有很多不同分子量的肽，经分子筛分离应该有很多峰，可是为什么只出了一个穿透峰呢，明白的请帮我分析一下。我用的填料是葡聚糖凝胶G25，柱子是1.6*40cm的。上样浓度是50mg/ml，不出峰是不是跟浓度有关系啊？ |
回复此楼
| 我最近也在做这方面的东西，根据你的情况说点我的观点，希望对你有用。首先个人觉得你的样品浓度有点高，本人也做过50mg/mL的浓度，分离效果很不好，25就很好，大部分博士硕士论文的浓度也是25；第二，您的问题中没有提到流速，流速是影响分离效果的主 要因素，根据文献和我自己做实验的情况，我觉得0.5mL/min是比较合适的。第三，如其他人所说，你的柱子高度确实不高，柱子高度有点低。第四，还有可能就是你的多肽的分子量不在g25的分离范围内，你可以先做一下分子量分布，然后选择合适的凝胶。第五，你的收集管的体积要尽量小，这样你分开的峰才不会因收集量大而又混合在一起。希望对你有用。 |
14楼2014-04-23 09:47:24
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
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2楼2014-04-19 23:14:09
1034181008
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3楼2014-04-19 23:22:30
//安生
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加油 4楼2014-04-22 08:44:06