| 查看: 3813 | 回复: 29 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
夏菡小屋金虫 (正式写手)
|
[求助]
姜的总RNA提取，电泳只有一条带已有5人参与
|
||
见图，这是我今天提取姜的总RNA结果图，旁边是TAKARA的DL5000 marker，用的是1.2%的普通琼脂糖凝胶电泳，总共提取了7管，用了三个不同的方法，其中一个方法（Lane 3）未见条带，其余均有明显条带，感觉有降解，但只有一个明显的条带，这是28s RNA吗？姜的28s 和18s，5s RNA到底是多大啊，求指导！！这种图显示，应该问题出在什么地方？ 无标题1.png |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有223人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
25楼2014-04-21 16:32:07
2楼2014-04-19 15:55:56
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24326.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
3楼2014-04-19 17:27:13
夏菡小屋
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2531.5
- 散金: 39
- 帖子: 575
- 在线: 149.7小时
- 虫号: 1114411
- 注册: 2010-10-05
- 性别: MM
- 专业: 微生物药物
|
抽提缓冲液：0.25M NaCl，0.05M Tris-HCl（pH7.5），20mM EDTA，1%（w/v）SDS，4%(w/v) PVP(M.W.360,000) 提取步骤： 1.1.5ml离心管中加入0.5ml抽提缓冲液和0.5ml 苯酚氯仿异戊醇（25:24:1）； 2.0.5g冰冻样品至研钵中，在液氮存在下研磨成粉末； 3.转移1g样品至离心管中（步骤1），涡旋剧烈震荡混匀； 4.4℃离心12000rpm*10min； 5.转移上清至另一离心管中，加入等体积的 苯酚氯仿异戊醇（25:24:1），4℃离心12000rpm*3min，重复此步骤直到能看到一个清晰的界面； 6.转移上清至新的离心管中，加入十分之一体积3M醋酸钠(pH5.2)以及2.5倍体积冷无水乙醇，混匀后，4℃孵育30min； 7.再次4℃离心12000rpm*20min； 8.冷的70%乙醇洗涤后干燥，加入200μL DEPC处理水溶解沉淀； 9.转移上清至新的离心管中加入4M LiCl至终浓度为2M，冰上放置1h，4℃离心12000rpm*20min； 10. 冷的70%乙醇洗涤后干燥，加入50μL DEPC处理水溶解沉淀； 请问我的步骤有问题吗? |
4楼2014-04-19 17:48:16